KS-NailMel-1：一种新型甲装置黑色素瘤细胞系的建立及其在靶向治疗研究中的意义

这篇研究成功建立了首个源自日本患者的甲装置黑色素瘤（NAM）细胞系KS-NailMel-1，填补了该罕见肿瘤研究模型的空白。通过全外显子测序（WES）和短串联重复（STR）分析证实其与原发肿瘤的遗传一致性，并发现NECTIN4蛋白的显著表达，为抗体偶联药物（ADC）靶向治疗提供了新思路。细胞系表现出稳定的增殖（倍增时间38.6±1.94 h）、侵袭性和球体形成能力，且对紫杉醇等化疗药物敏感，为NAM的机制研究和药物开发提供了重要工具。

　　

Abstract
甲装置黑色素瘤（NAM）是一种发生在手足甲装置的特殊皮肤黑色素瘤亚型。由于缺乏有效系统疗法，转移性NAM预后极差。本研究从68岁日本女性患者的左环指甲原发肿瘤中成功建立KS-NailMel-1细胞系，该细胞可稳定传代超过9个月，倍增时间为38.6±1.94 h，具有持续增殖、球体形成和侵袭能力。通过STR、WES和免疫组化证实其与原发肿瘤的一致性。Western blot检测显示该细胞表达潜在治疗靶点NECTIN4，为NAM基础与临床前研究提供了珍贵资源。

Introduction
NAM占皮肤黑色素瘤的0.7-3.5%，具有独特的遗传背景。尽管免疫检查点抑制剂（ICI）和BRAF/MEK抑制剂改善了黑色素瘤治疗，但NAM因BRAF突变率低（约10%）和免疫治疗耐药仍面临挑战。癌症细胞系是基础研究的关键工具，但NAM细胞系此前仅有中国团队报道的XYAM-2。

Materials and methods
研究经日本九州大学医院伦理委员会批准（批号21050-00）。通过胶原酶消化原发肿瘤组织建立细胞系，采用STR和WES验证细胞身份。通过流式细胞术（DNA指数1.86±0.307）和G显带核型分析（82-86条染色体）确认基因组异常。功能实验包括球体形成、Transwell侵袭和划痕迁移实验，药物敏感性测试采用CCK-8法。

Results

1. 临床特征：患者指甲床可见黑色结节伴周围色素扩散，组织学显示肿瘤细胞浸润至皮下甚至骨质。免疫组化显示PRAME和SOX10弥漫阳性，Melan-A局灶阳性。
2. 细胞特性：KS-NailMel-1呈星形/多边形，形成紧密球体（直径>1 mm），侵袭能力显著高于SM2-1细胞系（p<0.01），伴随E-cadherin下调（p<0.05）和vimentin上调。
3. 遗传特征：WES发现20,423个共有突变，包括EGFR、ERBB2和TP53等癌基因变异，但BRAF/NRAS/NF1均为野生型。
4. 标志物表达：RT-PCR显示PRAME、SOX10、HMB45和MLANA阳性，Western blot检测到NECTIN4膜/浆表达，而HER3蛋白未检出。
5. 药物敏感性：对紫杉醇（IC₅₀
   5.80±2.63 nM）、达卡巴嗪（4.12±0.495 μM）和卡铂（7.30±3.80 μM）敏感，浓度均低于血浆峰浓度（C_max
   ）。

Discussion
KS-NailMel-1是第二个报道的原代NAM细胞系，与XYAM-2相似均为三阴性（BRAF/NRAS/NF1野生型），但首次报道了NECTIN4的表达。其高侵袭性可能与EMT标志物改变（E-cadherin^low
/vimentin^high
）和TERT过表达（无启动子突变）相关。NECTIN4作为ADC靶点（如enfortumab vedotin）的潜力值得探索，而化疗敏感性数据支持传统药物在NAM中的应用价值。

未来方向
需建立异种移植模型验证体内成瘤性，并基于WES发现的EGFR/ERBB2突变探索靶向联合策略。该细胞系将促进NAM分子机制解析和个体化治疗开发。