印度晚期皮肤鳞状细胞癌患者来源的新型细胞系ACSCC1的建立及其分子特征解析

（编辑推荐语）本研究成功建立印度晚期皮肤鳞状细胞癌（CSCC）患者来源的新型细胞系ACSCC1，通过全基因组测序（WGS）发现TP53、CDKN2A等关键基因突变，证实其高侵袭性、转移潜能及上皮-间质转化（EMT）特性。该模型填补了印度人群CSCC研究空白，为靶向癌症干细胞（CSCs）和肿瘤复发机制研究提供重要工具。

　　

引言
皮肤鳞状细胞癌（CSCC）作为第二大常见皮肤恶性肿瘤，其晚期病例治疗面临巨大挑战。印度人群CSCC研究缺乏代表性模型，本研究首次从印度晚期（T4N0）患者前臂肿瘤中建立ACSCC1细胞系，填补了这一空白。

材料与方法
通过外植体培养法获取原代细胞，采用MEM培养基（含10% FBS）长期传代。STR分析确认细胞系唯一性，流式细胞术检测DNA倍体，透射电镜（TEM）观察超微结构。全基因组测序（WGS）使用Illumina NovaSeq X平台（30X深度），通过GATK4分析突变谱。

结果

1. 细胞系特征
   ACSCC1呈现典型上皮形态（图1A），高表达角蛋白14/8（KRT14/KRT8）和间质标志物Vimentin（图1B-E），提示部分EMT状态。STR谱与原始肿瘤匹配，排除交叉污染（附表3）。HPV检测阴性（图2A），排除了病毒致癌因素。

2. 基因组异常
   DNA指数1.88（图2B），核型显示超二倍体（49-52条染色体）伴3/12号染色体增益和4/8/13/15号缺失（图2C）。WGS揭示高频C>T突变（35%），关键基因TP53、NOTCH1、CDKN2A等存在错义突变（图5E）。

3. 功能验证
   侵袭/迁移实验显示ACSCC1穿透Matrigel能力显著增强（图3A-D）。EMT相关基因Vimentin表达升高900倍，Zeb1/Twist1上调（图3E）。裸鼠皮下成瘤实验7天内形成肿瘤（图4A-B），尾静脉注射后肺转移经H&E和PET-CT证实（图4H-J）。

4. 超微结构异常
   TEM显示细胞连接减少和线粒体形态畸变（图2D-F），与高转移表型一致。球体形成实验证明其干细胞特性（图4E-G）。

讨论
ACSCC1的建立为印度人群CSCC研究提供独特模型：

• 临床相关性：源于未经治疗的晚期患者，保留肿瘤异质性；
• 分子机制：TP53/CDKN2A突变与TCGA数据吻合，MUC3A高频突变可能驱动转移；
• 应用前景：适用于药物筛选、EMT机制研究和靶向CSCs治疗开发。

局限性
需进一步验证突变基因功能，并探索线粒体异常与代谢重编程的关系。

（注：全文数据均源自原文实验，图示引用已隐去文献标识）