基于扇贝血细胞培养平台的简单转基因过表达技术推动软体动物功能遗传学研究

为解决软体动物因实验室培养困难及缺乏遗传工具而研究受限的问题，研究人员开发了一种基于Farrer扇贝（Chlamys farreri）原代血细胞培养的转基因表达平台。通过优化转染试剂（如X-tremeGENE 360）、DNA形式及培养条件，成功实现四种双壳类癌基因（Cf-Mdm2-like等）的EGFP标记亚细胞定位可视化。该技术为软体动物细胞分子生物学研究提供了高效工具，并可拓展至活体成像及DNA-蛋白质互作检测等领域。

　　

尽管软体动物在进化地位和商业价值上至关重要，但实验室条件维持困难与遗传工具匮乏长期阻碍其研究进展。近期突破显示，利用软体动物病毒启动子可实现转基因在软体动物细胞中的表达。基于此，研究者以海洋双壳类Farrer扇贝（Chlamys farreri）为模型，建立了一套高效的原代血细胞培养转基因平台。该技术仅需两步：血细胞采集与铺板后，与DNA-转染试剂混合物共孵育1-4天。通过系统评估七种转染试剂在三种双壳类中的表现，发现X-tremeGENE 360对C. farreri具有显著转染优势。进一步优化显示，培养基成分、DNA形态（环状/线性）及DNA-试剂配比均影响转染效率。应用该技术，团队成功解析了四种双壳类癌基因（Cf-Mdm2-like、Cf-c-Myc-like、Cf-Mortalin-like和Cf-Ras-like）经增强型绿色荧光蛋白（EGFP）标记后的动态亚细胞分布。这项血细胞平台不仅为软体动物基础研究开辟了新途径，更可兼容活细胞成像（live imaging）和DNA-蛋白质互作检测等前沿技术，极大降低了软体动物研究的准入门槛。