原发性硬化性胆管炎中EB病毒特异性T/B细胞应答的机制研究揭示疾病新靶点

本研究针对原发性硬化性胆管炎(PSC)这一病因不明的进展性肝病，通过系统分析504例PSC患者和904例健康对照的T细胞受体(TRB)库，结合噬菌体免疫沉淀测序(PhIP-seq)技术，首次揭示了EB病毒(EBV)特异性T/B细胞应答在PSC发病中的关键作用。研究发现PSC患者体内存在1,008个与疾病相关的T细胞克隆型，其中大部分受HLA-B*08:01和HLA-DRB1 * 03:01限制并靶向EBV抗原，同时血清学检测显示PSC患者抗EBV抗体反应显著增强。通过分析超过1.16亿份电子健康记录，研究进一步证实传染性单核细胞增多症与PSC发病风险显著相关(OR=12)。该研究为PSC的发病机制提供了新见解，发表在《Nature Medicine》上。

　　

原发性硬化性胆管炎(PSC)是一种病因不明的慢性胆汁淤积性肝病，其特征是胆管进行性纤维化和炎症，最终导致肝功能衰竭。目前肝移植是终末期PSC患者的唯一治疗选择，但令人困扰的是，即使进行肝移植后，仍有30-40%的患者会出现疾病复发。这种疾病的发病机制长期困扰着研究人员，虽然已知多个遗传变异位点与PSC相关，包括FOXP1、NFKB1和CD226等T细胞相关基因，以及HLA-B*08:01和HLA-DRB1 * 13:01等HLA等位基因，但驱动疾病发展的具体抗原靶点一直未被阐明。

来自德国基尔大学临床分子生物学研究所等多家机构的研究团队在《Nature Medicine》发表了一项突破性研究。通过对504例PSC患者和904例健康对照的T细胞受体(TRB)库进行深度测序，结合噬菌体免疫沉淀测序(PhIP-seq)技术，研究人员系统分析了PSC患者的适应性免疫应答特征，揭示了EB病毒(EBV)在PSC发病中的关键作用。

研究采用了多项关键技术：1)高通量T细胞受体测序(TCR-seq)分析外周血TRB库；2)噬菌体免疫沉淀测序(PhIP-seq)检测血清抗体反应；3)单细胞B细胞受体测序(BCR-seq)分析肝脏浸润B细胞；4)HLA分型与限制性分析；5)大规模电子健康记录分析(>1.16亿人)。样本来源于德国三家三级转诊中心的PSC患者和健康献血者，以及挪威奥斯陆大学医院的独立验证队列。

研究结果部分：

"Identifying PSC-associated TRB clonotypes"：通过比较PSC患者与健康对照的TRB库，研究人员鉴定了1,008个与PSC显著相关的T细胞克隆型。这些克隆型在挪威独立队列和美国的SPARC IBD队列中均得到验证，且在PSC患者的肝脏中富集程度高于外周血。

"PSC-associated clonotypes are restricted to risk HLA alleles"：研究发现这些疾病相关克隆型主要受已知的PSC风险HLA等位基因限制，特别是HLA-B*08:01和HLA-DRB1 * 03:01。通过分析CDR3氨基酸序列，研究人员发现了多个具有特征性基序的克隆型集群。

"PSC-associated clonotypes recognize mainly EBV antigens"：通过比对公共数据库和MIRA检测数据，研究发现PSC相关克隆型显著富集于EBV特异性克隆型，特别是针对EBV裂解期蛋白BZLF1和潜伏期蛋白EBNA3的克隆型。实验验证显示，使用HLA-B*08:01四聚体或抗原刺激可富集这些EBV特异性T细胞。

"Increased antibody responses against EBV in PSC"：PhIP-seq分析显示，PSC患者血清中抗EBV抗体反应显著增强，特别是针对EBV裂解期蛋白BMRF1的反应。肝脏浸润B细胞产生的单克隆抗体也显示出对EBV抗原的特异性。

"Infectious mononucleosis is associated with PSC"：通过分析超过1.16亿份电子健康记录，研究发现传染性单核细胞增多症(主要由EBV感染引起)与PSC发病风险显著相关(OR=12;95%CI,6.3-22.9)，这一关联强度高于其与炎症性肠病或多发性硬化的关联。

这项研究首次系统揭示了EBV特异性T/B细胞应答在PSC发病中的核心作用。研究发现PSC患者体内存在大量EBV特异性T细胞克隆型，这些克隆型受PSC风险HLA等位基因限制，并在肝脏中富集。同时，PSC患者表现出针对EBV裂解期抗原的增强抗体反应，提示EBV再激活可能在疾病发生中起关键作用。流行病学数据进一步支持EBV感染与PSC发病的关联。这些发现为理解PSC的发病机制提供了全新视角，提示针对EBV的特异性免疫干预可能成为未来PSC治疗的新策略。研究采用的免疫组库分析结合大规模流行病学验证的研究范式，也为其他自身免疫性疾病的研究提供了重要参考。