分枝杆菌噬菌体介导的基因转移技术为麻风分枝杆菌药物筛选与活体追踪提供新范式

来自全球的研究人员针对麻风分枝杆菌（Mycobacterium leprae）难以体外培养、遗传操作受限的难题，利用广宿主谱分枝杆菌噬菌体TM4成功实现基因递送，构建了基于BRET-纳米荧光素酶（GeNL）的快速药敏检测系统（LRM）。该研究首次证实TM4::GeNL噬菌体可感染麻风杆菌并实现72小时持续发光，建立24-48小时剂量依赖性体外药筛模型（如利福平、氨苯砜和Q203），同时通过电穿孔ColE1整合质粒实现小鼠足垫活体成像（IVIS）。这项突破为麻风病研究提供了基因操作工具和高效药筛平台。

　　

麻风分枝杆菌（Mycobacterium leprae）作为麻风病的病原体，长期因无法体外培养严重阻碍其遗传改造与药物研发。传统药筛方法依赖显微镜计数、放射性呼吸测量或qPCR，不仅耗时且需接触放射性物质。这项研究取得突破性进展：广宿主谱分枝杆菌噬菌体TM4成功将外源DNA导入麻风杆菌，携带生物发光共振能量转移（BRET）纳米荧光素酶报告系统（TM4::GeNL）后，可实现72小时持续发光监测。

当麻风杆菌接触利福平、氨苯砜及Q203等药物24-48小时后，TM4::GeNL感染产生的发光强度呈现剂量依赖性下降，由此建立仅需两天的体外药筛体系。更令人振奋的是，通过电穿孔将含GeNL报告基因的ColE1整合质粒转入麻风杆菌后，这些工程菌能在小鼠足垫中增殖，并借助活体成像系统（IVIS）直接观测。该成果不仅首次实现噬菌体对麻风杆菌的基因递送，更为研究其生物学特性提供了双管齐下的技术路径——既能进行高效体外药敏检测（LRM技术），又能实现动物模型内实时追踪，为攻克麻风杆菌不可培养的世纪难题开辟新思路。