m6A修饰依赖性上调lnc-28509通过调控细胞凋亡增强海参抗菌免疫的分子机制

本研究针对海参（Apostichopus japonicus）在细菌感染中lncRNA与m6A修饰的调控关系这一科学问题，揭示了lnc-28509通过m6A修饰上调表达，进而作为miR-2012的海绵分子促进凋亡诱导因子AIF-1积累，最终增强抗菌免疫的新机制。宁波大学团队发现METTL3介导的m6A修饰通过抑制lnc-28509降解提升其表达水平，为无脊椎动物表观转录组调控提供了重要理论依据。

　　

在海洋经济动物养殖业中，刺参（Apostichopus japonicus）因爆发性病害——尤其是由灿烂弧菌（Vibrio splendidus）引起的皮肤溃疡综合征（SUS）——每年造成巨大经济损失。尽管长链非编码RNA（lncRNA）和N⁶
-甲基腺苷（m6A）修饰在高等脊椎动物免疫调控中的作用已被广泛研究，但这两者在无脊椎动物抗菌防御中的协同机制仍是未解之谜。宁波大学的研究团队通过系统研究，首次揭示了m6A甲基转移酶METTL3通过表观转录调控激活lnc-28509表达，进而调控细胞凋亡通路的新机制。

研究采用qPCR检测细菌感染后lnc-28509表达动态，通过RNA干扰（RNAi）和双荧光素酶报告系统验证其功能，结合m6A-seq和甲基化抑制剂分析修饰位点。样本来自125g规格的养殖刺参，使用10⁷
CFU/mL灿烂弧菌感染模型。

The role of sea cucumber lnc-28509 in apoptosis and bacterial infection
定量分析显示lnc-28509在细菌感染后表达显著上调。敲低该lncRNA导致体腔细胞凋亡率下降38%，细菌清除效率降低2.3倍，证实其具有促凋亡和抗菌双重功能。

METTL3-mediated m6A modification regulates lnc-28509 expression
m6A测序发现lnc-28509转录本存在典型RRACH motif修饰，感染后修饰水平增加4.7倍。METTL3沉默使lnc-28509半衰期从8小时缩短至3小时，证实m6A修饰通过抑制RNA降解维持其稳定性。

lnc-28509 functions as a miRNA sponge for miR-2012
双荧光素酶实验揭示lnc-28509通过吸附miR-2012解除其对凋亡诱导因子AIF-1 mRNA的抑制作用。过表达miR-2012使体腔细胞凋亡率下降42%，而共转染lnc-28509可逆转此效应。

Discussion
该研究首次阐明m6A-lncRNA-miRNA三级调控网络在无脊椎动物先天免疫中的作用：METTL3催化的m6A修饰→lnc-28509稳定性增强→竞争性结合miR-2012→AIF-1表达上调→促进细胞凋亡→增强细菌清除。这一发现不仅为海参病害防控提供新靶点（如通过调控METTL3活性增强抗病力），更开创性地证实表观转录调控在低等动物免疫防御中的普适性规律。研究获得宁波市自然科学基金（2022J125）和浙江省属高校基本科研业务费（SJLZ2024001）支持，成果发表在《Fish》期刊。