米替福新-银纳米颗粒复合物的合成与评估：与苯硝唑协同抗克氏锥虫作用及机制研究

这篇研究通过合成氧化支链淀粉-米替福新-银纳米颗粒(OA-MilAg-NP)复合物，采用FT-IR、SEM、TEM等技术表征其结构特征（粒径10.14-18.42 nm），发现该复合物对克氏锥虫(ATCC 50828)的抑制活性是米替福思的2倍（SI值更高），且与苯硝唑(BZN)联用呈现显著协同效应（FICI≤0.5），为开发低毒性抗恰加斯病新药提供了纳米技术解决方案。

　　

材料与方法
研究采用克氏锥虫ATCC 50825株和L929成纤维细胞系，通过过氧化氢-硫酸铜氧化法制备氧化支链淀粉(OA)载体，负载硝酸银和米替福思(Mil)形成OA-MilAg-NP复合物。FT-IR谱图显示1365 cm^-1
处甲基振动峰和1022 cm^-1
处P-O-C键特征峰证实复合物成功合成。透射电镜(TEM)显示纳米颗粒呈球形，粒径10.14-18.42 nm。

抗锥虫活性评估
采用微量肉汤稀释法测定，OA-MilAg-NP对锥虫的IC₅₀
随时间递减（72小时达最低），其最小杀寄生虫浓度(MPC)比单独米替福思降低2个稀释度。值得注意的是，虽然米替福思单体抗锥虫活性更强（IC₅₀
1.95 μg/mL），但其细胞毒性（IC₅₀
27 μg/mL）显著高于纳米复合物（IC₅₀
764 μg/mL），使复合物选择性指数(SI)提升2倍。

协同作用机制
棋盘法实验显示，OA-MilAg-NP与苯硝唑联用的FICI指数在24-72小时均<0.5，等辐射分析证实协同效应最显著出现在48小时。米替福思与苯硝唑组合也呈现稳定协同性（FICI=0.375），提示纳米化未影响药物协同潜力。

讨论
该研究首次将抗利什曼病药物米替福思通过纳米载体（氧化支链淀粉）与银离子结合，其作用机制可能涉及：① 破坏锥虫钙离子稳态（通过鞘氨醇激活的Ca²⁺
通道）；② 抑制线粒体细胞色素c氧化酶；③ 纳米载体增强药物靶向性。与文献报道的壳聚糖纳米颗粒（46.61 nm）相比，本研究更小粒径（<20 nm）可能提升细胞穿透效率。

局限性
未测定复合物的流体力学直径、多分散指数(PDI)等物化参数，且仅测试了锥虫表鞭毛体阶段的活性，后续需开展针对无鞭毛体的细胞内实验和动物模型验证。

结论
氧化支链淀粉基纳米载体成功实现了米替福思的增效减毒，其与苯硝唑的协同作用为开发抗恰加斯病组合疗法提供了新思路，未来可探索该纳米平台负载其他抗寄生虫药物的潜力。