基于AcMNPV基因组精简的杆状病毒表达载体优化及其蛋白表达效率提升研究

为解决杆状病毒表达系统(BEVS)中外源蛋白表达效率优化问题，来自[未知单位]的研究人员通过删除Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV)基因组中ac58-61等四个非必需片段，构建了127-129 kb精简载体。研究发现ac110-114和ac116-119片段删除可提升蛋白产量，ac58-61删除则显著抑制表达，最终获得3个保持体外/体内感染力的高效表达载体，为BEVS应用提供优化方案。

　　

在昆虫细胞蛋白生产领域，杆状病毒表达系统(Baculovirus Expression Vector System, BEVS)堪称利器，其中明星载体——苜蓿银纹夜蛾多核型多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus, AcMNPV)的基因组暗藏玄机。这个包含155个开放阅读框(ORFs)的病毒基因组中，竟有近半数基因在体外培养时属于"可有可无"的冗余序列。

科研团队此前就发现，大刀阔斧地删除AcMNPV基因组中的非必需大片段，不仅能提升外源蛋白的生产效率，还能让病毒载体成功"瘦身"超过10 kb。这次他们更上层楼，在已有精简载体基础上，精准剔除了四个包含多基因的非必需区域（ac58-61、ac110-114、ac116-119和ac121-124），就像为病毒基因组做了一场精密的"微创手术"。

实验结果显示，这些基因片段的删除展现出截然不同的效果：ac110-114和ac116-119的移除让蛋白生产如虎添翼，ac121-124删除则波澜不惊，而ac58-61的缺失竟让蛋白表达遭遇"滑铁卢"。更有趣的是，当尝试同时删除两个片段时，外源蛋白表达和病毒复制就会像失衡的天平，出现明显波动。

这些经过基因组"塑形"的病毒载体不仅能在培养细胞中保持感染力和蛋白表达能力，注射到草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)幼虫体内后，依然展现强劲的感染活力。最终获得的三个精简版载体长度仅127-129 kb，比前代载体再缩减1.4-2.3%，为BEVS的蛋白生产应用提供了更优化的"分子工具包"。