METTL3-PAX5互作调控B细胞身份维持与系统性红斑狼疮中B细胞过度活化的机制研究

本研究针对系统性红斑狼疮（SLE）中B细胞异常活化的关键机制，揭示了RNA甲基转移酶METTL3通过m6 A修饰稳定PAX5 mRNA，而PAX5转录因子又正向调控METTL3表达的互作环路。研究人员采用临床样本分析、小鼠模型和体外实验，结合MeRIP-seq等高通量技术，首次阐明该表观遗传调控网络在维持B细胞身份和促进自身免疫反应中的核心作用，为SLE治疗提供了新靶点。

　　

系统性红斑狼疮（SLE）是一种以自身抗体大量产生为特征的复杂自身免疫病，B细胞的异常活化是其核心病理环节。尽管已知B细胞在SLE中呈现过度活跃状态，但驱动这种自身反应性B细胞持续活化的分子机制尚未完全阐明。近年来，RNA表观遗传修饰尤其是N⁶
-甲基腺苷（m⁶
A）被发现参与免疫调控，但其在SLE B细胞中的具体作用仍属空白。

中南大学湘雅医院风湿免疫科Yiying Yang、Huali Zhang和Muyao Guo团队在《Molecular Medicine》发表的研究，首次揭示了m⁶
A甲基转移酶METTL3与B细胞关键转录因子PAX5之间的互作机制。研究人员通过分析90例初治SLE患者和狼疮小鼠模型的B细胞，结合体外激活实验和体内干预研究，发现METTL3-m⁶
A-PAX5轴构成的正反馈环路是维持B细胞身份和促进自身免疫反应的关键开关。

关键技术方法包括：1）临床队列（SLE患者和健康对照外周血B细胞）和动物模型（降植烷诱导狼疮小鼠）样本分析；2）m⁶
A点印迹和MeRIP-seq全转录组m⁶
A修饰图谱分析；3）流式细胞术检测B细胞亚群和活化标志物；4）RNA免疫共沉淀（RIP）和RNA稳定性实验；5）电泳迁移率变动分析（EMSA）和双荧光素酶报告基因验证转录调控。

主要研究结果：

METTL3在狼疮B细胞中升高并与疾病活动度相关
• 狼疮小鼠和SLE患者B细胞中METTL3表达和m⁶
A水平显著升高
• 外周血CD19⁺
B细胞METTL3水平与SLEDAI评分、抗C1q抗体和TNFα呈正相关

m⁶
A和METTL3在B细胞活化与终末分化中的动态变化
• LPS诱导的B细胞活化早期m⁶
A和METTL3水平升高，但在分化为抗体分泌细胞（ASC）时急剧下降
• MeRIP-seq发现B细胞关键转录因子（如PAX5、Bach2）mRNA存在动态m⁶
A修饰

METTL3对B细胞发育和亚群稳态的调控
• METTL3过表达促进骨髓前B细胞发育，抑制脾脏边缘区B细胞（MZB）比例
• 抑制剂STM2457处理可抑制LPS/CD40L诱导的B细胞早期活化标志物（CD95、CCR6）表达

METTL3与PAX5的互作机制
• METTL3通过结合PAX5 mRNA的3'UTR区域（-347至-365位点）增强其稳定性
• PAX5直接结合METTL3启动子驱动其转录，形成正反馈环路
• SLE患者B细胞中PAX5与METTL3表达呈显著正相关

结论与意义：
该研究首次阐明METTL3介导的m⁶
A修饰通过稳定PAX5 mRNA维持B细胞身份，而PAX5又转录激活METTL3表达，形成放大B细胞活化信号的表观遗传-转录因子互作网络。这一发现不仅解释了自身反应性B细胞在SLE中持续存在的分子基础，还为开发靶向METTL3-m⁶
A-PAX5轴的治疗策略提供了理论依据。研究采用的METTL3特异性抑制剂STM2457在动物模型中显示出抑制B细胞过度活化的潜力，提示其作为SLE治疗新靶点的转化价值。

该研究的创新性在于：1）揭示m⁶
A修饰在B细胞命运决定中的双向调控作用；2）发现SLE特有的表观遗传-转录因子正反馈环路；3）提供从RNA修饰层面干预自身免疫疾病的新思路。未来研究可进一步探索不同B细胞亚群（如年龄相关B细胞）中该通路的特异性，以及联合靶向METTL3与常规免疫抑制剂的协同治疗效果。