天然化合物Hyptolide通过内质网应激和GSK3β/β-catenin通路逆转卵巢癌顺铂耐药性的机制研究

本研究针对卵巢癌高复发率和顺铂耐药性难题，揭示了天然化合物Hyptolide通过激活内质网应激(ER stress)通路（GRP78/ATF6/caspase-12）诱导细胞凋亡，并经由GSK3β介导的β-catenin胞质转位促进E-cadherin表达，实现间质-上皮转化(MET)，显著增强耐药细胞对顺铂的敏感性。该发现为开发新型卵巢癌联合治疗方案提供了重要理论依据。

　　

卵巢癌作为女性第七大常见恶性肿瘤，其五年生存率不足50%，主要归因于晚期诊断和化疗耐药。尽管铂类药物如顺铂是临床一线选择，但78%患者面临复发和耐药挑战。这种困境促使科学家将目光转向天然化合物，其中从药用植物Hyptis pectinata分离的Hyptolide因其α,β-不饱和内酯结构展现出抗癌潜力，但其作用机制尚未阐明。来自印度尼西亚迪波内戈罗大学和台湾成功大学的研究团队通过系统研究，发现Hyptolide能双重调控内质网应激和Wnt/β-catenin通路，为克服卵巢癌耐药提供了新策略，相关成果发表于《Journal of Ovarian Research》。

研究采用CCK-8法检测细胞活力，Western blot分析ER应激标志物（GRP78、ATF6）和凋亡相关蛋白（caspase-3/9/12），免疫荧光追踪β-catenin亚细胞定位，并通过联合用药实验评估协同效应。样本来源于人卵巢癌细胞系IGROV1及其顺铂耐药株（CP1#1/CP1#2）。

【Hyptolide通过ER应激途径抑制卵巢癌细胞活力】
实验显示Hyptolide呈浓度依赖性抑制野生型(WT)和耐药细胞生长，50μM处理使WT细胞存活率降至60%。分子机制上，Hyptolide显著上调ER应激标志物GRP78（2.1倍）和剪切型ATF6（1.8倍），并激活caspase-12介导的凋亡通路。ER应激抑制剂4-PBA可逆转Hyptolide的细胞毒性，证实ER应激是其关键作用机制。

【GSK3β激活逆转顺铂耐药】
在耐药细胞中，Hyptolide特异性降低GSK3β在Ser9/21位点的磷酸化（p-GSK3β^Ser9/21
减少40%），增强其激酶活性。这种效应伴随ABCG2（药物内流转运体）上调和P-gp（外排泵）下调，提示其可改善药物蓄积。值得注意的是，该现象仅在耐药细胞中出现，表明Hyptolide具有选择性耐药逆转作用。

【β-catenin重分布诱导MET】
免疫荧光显示耐药细胞中β-catenin主要定位于核周区域（核质比N/C=1.8），而Hyptolide处理4小时后使其向膜转移（N/C=0.6）。分子水平上，Hyptolide促进β-catenin在Tyr654位点磷酸化（增加2.3倍），抑制其转录活性。这种调控伴随E-cadherin表达上调（2.1倍）和间质标志物N-cadherin/vimentin下调，证实发生了间质-上皮转化(MET)。

【协同增强顺铂敏感性】
联合实验显示，10μM Hyptolide使耐药细胞对顺铂的IC₅₀
降低3.5倍，实际存活率较预期值下降28%（p<0.01）。这种协同效应与MET进程呈正相关，GSK3β抑制剂LiCl可阻断Hyptolide诱导的E-cadherin上调，验证了GSK3β/β-catenin通路的核心地位。

研究结论指出，Hyptolide通过双重机制发挥抗癌作用：一方面通过ER应激直接诱导凋亡，另一方面通过GSK3β介导的β-catenin调控逆转EMT表型。这种"一石二鸟"的作用模式使其成为极具潜力的耐药卵巢癌治疗候选药物，特别是与顺铂联用可产生协同效应。该研究不仅阐明了Hyptolide的分子靶点，还为开发基于天然产物的联合疗法提供了理论框架，对改善卵巢癌患者预后具有重要临床意义。