芝加哥天蓝6B通过调控MAPK/NF-κB通路缓解大鼠膝骨关节炎的机制研究

本研究揭示了芝加哥天蓝6B（CSB）通过抑制MAPK/NF-κB信号通路，显著改善IL-1β诱导的软骨细胞炎症反应及大鼠DMM模型中的骨关节炎（OA）进展。实验证实CSB能下调基质降解酶（ADAMTS5/MMP13）表达、上调聚集蛋白聚糖（Aggrecan）和II型胶原（COL2A1），并阻断p65核转位，为OA治疗提供了新型靶向策略。

　　

芝加哥天蓝6B调控MAPK/NF-κB通路缓解大鼠膝骨关节炎

CSB缓解IL-1β介导的细胞外基质减少
研究团队通过IL-1β刺激模拟骨关节炎（OA）病理环境，发现芝加哥天蓝6B（CSB）能剂量依赖性抑制软骨细胞外基质（ECM）的流失。CCK-8实验证实CSB在≤48 μM浓度下无细胞毒性。经CSB处理后，甲苯胺蓝和阿利新蓝染色显示蛋白聚糖释放显著增加，提示其具有保护软骨基质的作用。

CSB抑制软骨细胞炎症反应
在IL-1β诱导的炎症模型中，qPCR和Western blot结果显示CSB（10-20 μM）显著下调ADAMTS5、MMP3/MMP13表达，同时上调Aggrecan和COL2A1。免疫荧光进一步验证CSB降低MIF蛋白表达，表明其通过靶向巨噬细胞迁移抑制因子（MIF）发挥抗炎作用。

MAPK/NF-κB通路的关键调控
时间梯度实验发现CSB可抑制p38/ERK磷酸化和IκBα降解，阻断p65核转位。免疫荧光显示CSB处理组p65核内荧光强度降低，证实其通过抑制经典炎症通路阻断NF-κB活化。这种双重通路调控机制为CSB的协同效应提供了新证据。

DMM模型中的治疗验证
大鼠内侧半月板失稳（DMM）模型显示，CSB（5 mg/kg）治疗8周后，番红O染色显示软骨退化减轻，ELISA检测到关节局部MIF水平下降。器官HE染色证实CSB无显著毒性，凸显其临床转化潜力。

讨论与展望
相比其他MIF抑制剂（如ISO-1），CSB具有成本低、安全窗宽（≤48 μM）和多靶点优势（同时调控NF-κB/MAPK）。尽管机制上存在p38抑制等未解谜题，但其通过促进MIF泛素化降解和阻断三聚体活性的特性，为OA治疗提供了新思路。未来需推进临床研究以验证其长期疗效。