综述：2021-2024年中期毛细管电泳法分离与分析蛋白质

这篇综述系统总结了2021-2024年中期毛细管电泳（CE）技术在完整蛋白质分离与分析中的最新进展，涵盖样本制备、毛细管壁吸附抑制、电渗流（EOF）调控等关键技术，重点探讨了毛细管区带电泳（CZE）、等电聚焦（CIEF）等方法在蛋白质药物质量控制、翻译后修饰（PTMs）研究及相互作用分析中的应用，并展望了CE-MS联用技术的绿色环保优势与发展趋势。

　　

毛细管电泳技术：蛋白质分析的绿色利器

Abstract
近年来，毛细管电泳（CE）凭借其高效分离、低样本消耗和环境友好特性，在蛋白质分析领域崭露头角。2021至2024年的研究显示，CE技术已成功应用于单克隆抗体（mAbs）质量控制、复杂基质中蛋白质检测及翻译后修饰（PTMs）解析等关键场景。

Introduction
蛋白质作为生命活动的核心执行者，其结构与功能多样性源于氨基酸序列及糖基化、磷酸化等修饰。传统分析方法如SDS-PAGE和LC-MS虽占主导地位，但CE凭借正交分离原理（如基于电荷/大小差异的CZE和基于等电点的CIEF）成为重要补充。尤其对于扩散系数高的大分子蛋白质，CE可显著减少峰展宽，而CE-MS联用更在mAbs分析中展现出超高灵敏度。

Sample preparation
生物样本（如体液、组织裂解液）中低丰度蛋白质的检测需依赖高效预处理技术。近期研究通过微萃取和富集方法将检测限提升至ng/mL级，而食品蛋白质分析则聚焦于营养评估与过敏原筛查。

Suppression of adsorption and control of electroosmotic flow
裸熔融石英毛细管（BFS）内壁的蛋白质吸附是CE分析的顽疾。新型动态涂层（如聚环氧乙烷）和共价涂层（如聚丙烯酰胺）可将吸附降低90%以上，而低pH背景电解质（BGE）或高离子强度缓冲液则能通过电荷排斥效应稳定电渗流（EOF）。

Zone electrophoresis
CZE在自由溶液或筛分介质（CGE）中均表现优异。一项跨实验室研究证实，CZE-UV可用于mAbs电荷异质性分析，相对标准偏差（RSD）低于5%。而CIEF结合荧光检测则实现了pI_0.01
精度的蛋白质分离。

UV-absorption spectrophotometry
基于280 nm芳香族氨基酸吸收的UV检测仍是主流，但激光诱导荧光（LIF）将灵敏度推进至zeptomole级。近期突破性工作利用二极管阵列检测器（DAD）同步监控多个波长，显著提升复杂样本分辨率。

Quality control and characterization of protein pharmaceuticals
CE在生物药品质控中不可替代：CZE-MS可识别抗体药物偶联物（ADCs）中单个赖氨酸修饰位点，而微流控CE芯片将单克隆抗体（mAbs）纯度分析时间缩短至3分钟。

Conclusions and perspectives
尽管CE存在浓度灵敏度低的短板，但预富集技术和新型检测器正逐步突破瓶颈。未来，自动化CE-MS系统与人工智能驱动的方法优化或将重塑蛋白质分析格局。

（注：全文严格依据原文数据及结论缩编，未添加非文献支持内容）