双氢青蒿素通过TNF-α通路抑制血管生成增强乳腺癌抗PD-1免疫治疗疗效

本研究针对乳腺癌免疫治疗中血管异常导致的免疫抑制微环境问题，探索了双氢青蒿素（DHA）通过调控TNF-α通路抑制肿瘤血管生成的作用机制。研究发现DHA能显著减少肿瘤血管密度、增加周细胞覆盖，并协同抗PD-1疗法增强T细胞浸润、逆转巨噬细胞表型，为克服免疫治疗耐药提供了新型联合策略。该成果发表于《Biochemical and Biophysical Research Communications》，为开发低毒抗血管生成药物提供了重要理论依据。

　　

肿瘤免疫治疗的困境与破局
在乳腺癌治疗领域，免疫检查点抑制剂（ICIs）虽为晚期患者带来希望，但异常血管网络形成的免疫抑制微环境（TME）严重制约疗效。这些扭曲的血管不仅阻碍药物递送，更通过缺氧环境招募调节性T细胞（Tregs）和肿瘤相关巨噬细胞（TAMs），形成"血管异常-免疫抑制"的恶性循环。现有抗血管药物如贝伐珠单抗虽能改善血管结构，却伴随高血压等严重副作用，迫使科学家寻找更安全的替代方案。

湖北中医药大学团队将目光投向传统中药青蒿的活性衍生物——双氢青蒿素（DHA）。这种疟疾治疗药物因具有优异的水溶性和低毒性，近年被发现可抑制血管内皮细胞活化。研究人员通过小鼠乳腺癌模型和细胞实验，首次揭示DHA通过靶向TNF-α通路重塑肿瘤血管、增强PD-1阻断疗效的分子机制，相关成果发表于《Biochemical and Biophysical Research Communications》。

关键技术方法
研究采用4T-1小鼠乳腺癌细胞系和SVEC4-10血管内皮细胞构建体外模型，通过条件培养基（CM）实验评估DHA对血管生成的抑制。体内实验使用BALB/c小鼠移植瘤模型，结合免疫组化分析血管密度（CD31标记）和周细胞覆盖（α-SMA标记）。网络药理学预测与RNA-seq筛选关键通路，通过TNF-α补充实验验证机制。流式细胞术检测T细胞亚群和巨噬细胞表型（M1/M2）变化。

主要研究结果
DHA抑制4T-1细胞恶性行为
CCK8实验显示DHA以浓度和时间依赖性方式抑制4T-1细胞活力（50-100 μM）。克隆形成、划痕和Transwell实验证实DHA可降低肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力，为后续血管研究奠定基础。

DHA逆转肿瘤诱导的血管异常
SVEC4-10细胞在4T-1条件培养基中呈现的管腔形成能力被DHA显著抑制。小鼠模型中，DHA治疗组肿瘤血管密度降低40%，周细胞覆盖率提升2.3倍，表明其能有效修复血管结构异常。

协同抗PD-1重塑免疫微环境
流式数据显示DHA+抗PD-1组CD8⁺
T细胞浸润增加1.8倍，同时促炎的M1型巨噬细胞比例上升。这种免疫微环境的重编程使联合治疗组肿瘤体积较单药组缩小52%。

TNF-α通路的核心作用
网络药理学锁定TNF-α为DHA作用的关键靶点。RNA-seq发现DHA下调VEGFA、MMP9等促血管因子表达。外源添加TNF-α可部分抵消DHA的血管正常化效应，证实该通路的调控地位。

研究启示与展望
该研究首次阐明DHA通过"血管-免疫"双途径增强乳腺癌免疫治疗的机制：一方面通过TNF-α依赖的方式修复血管结构，改善药物输送和氧供；另一方面解除血管异常导致的免疫抑制，为PD-1阻断创造有利条件。相较于现有抗血管药物，DHA展现出血毒性低、来源广泛等优势，特别适合与中国患者广泛使用的PD-1抑制剂联用。

值得注意的是，DHA对巨噬细胞极化的调节提示其可能具有更广泛的免疫调控作用。未来研究可探索DHA与其他ICI（如CTLA-4抑制剂）的协同效应，以及在三阴性乳腺癌等难治亚型中的应用。团队负责人Fenghua Wu强调，这项源于中药的发现为开发具有中国特色的肿瘤联合治疗方案提供了新思路。