MicroRNA let-7a通过靶向HMGA2抑制口腔黏膜下纤维化的分子机制研究

本研究针对口腔黏膜下纤维化(OSF)这一恶性转化风险高的纤维化疾病，首次揭示let-7a通过靶向调控HMGA2抑制肌成纤维细胞活化的分子机制。研究人员通过原代细胞培养、功能回复实验和双荧光素酶报告系统证实，let-7a在OSF病变组织中显著下调，其过表达可显著降低α-SMA表达和胶原收缩能力，为OSF治疗提供了新靶点。

　　

口腔黏膜下纤维化(OSF)是一种以口腔黏膜进行性纤维化为特征的慢性疾病，在东南亚地区尤为高发，与咀嚼槟榔的习惯密切相关。这种疾病不仅导致患者张口受限，更令人担忧的是其高达4.2%的恶性转化率。尽管已知槟榔中的主要生物碱arecoline可通过TGF-β1/Smad2信号通路促进肌成纤维细胞转化，但具体的分子调控机制仍不清楚。肌成纤维细胞作为纤维化的关键效应细胞，其标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在OSF患者病变组织中的表达水平与疾病进展呈正相关，这提示靶向肌成纤维细胞活化可能是治疗OSF的新策略。

MicroRNA let-7家族在多种纤维化疾病中发挥重要作用，但其在OSF中的功能尚未阐明。中山医学大学的研究团队在《Journal of Dental Sciences》发表的研究首次系统揭示了let-7a通过靶向高迁移率族蛋白AT-hook 2(HMGA2)调控OSF进展的分子机制。研究发现OSF患者纤维化组织中let-7a表达显著降低，而体外实验证实arecoline可剂量依赖性地下调let-7a表达。通过功能获得和缺失实验，研究人员证实let-7a过表达可显著抑制肌成纤维细胞的收缩、迁移和伤口愈合能力。机制研究表明，let-7a直接结合HMGA2 mRNA的3'非翻译区(3'-UTR)并抑制其表达，而HMGA2敲除可重现let-7a过表达的抑纤维化效果。这些发现不仅阐明了let-7a/HMGA2轴在OSF中的关键作用，也为开发新型靶向治疗策略提供了理论依据。

研究采用的主要技术包括：从OSF患者获取配对的纤维化和非纤维化组织进行原代成纤维细胞培养；实时定量PCR检测let-7a和HMGA2表达；胶原凝胶收缩实验和Transwell迁移实验评估肌成纤维细胞功能；双荧光素酶报告系统验证let-7a与HMGA2的直接相互作用；慢病毒介导的HMGA2基因沉默等。

研究结果显示：

1. 在OSF患者纤维化组织中let-7a表达显著下调，且arecoline处理可剂量依赖性地降低let-7a水平。
2. let-7a过表达显著抑制肌成纤维细胞的胶原收缩能力、迁移能力和伤口愈合能力。
3. let-7a直接靶向HMGA2 mRNA的3'-UTR，调控其表达水平。
4. HMGA2基因沉默可降低α-SMA表达和胶原收缩能力，模拟let-7a过表达的效果。

讨论部分指出，HMGA2作为染色质相关转录调控因子，在多种纤维化疾病中发挥重要作用。研究首次在OSF中证实let-7a/HMGA2轴的调控作用，这不仅解释了arecoline诱导肌成纤维细胞转化的分子机制，也为开发基于let-7a的替代疗法或靶向HMGA2的抑制剂提供了新思路。值得注意的是，长链非编码RNA H19可能作为竞争性内源RNA(ceRNA)通过吸附let-7a来调控HMGA2表达，这提示H19/let-7a/HMGA2轴可能是干预OSF进展的潜在靶点。此外，研究还提到表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)可通过调控LIN28B/let-7a/HMGA2反馈环发挥抗纤维化作用，这为开发植物源性治疗药物提供了参考。

该研究的临床意义在于，基于间充质干细胞来源的外泌体(MSC-EVs)天然富含let-7a的特性，未来或可开发let-7a富集的工程化外泌体用于OSF治疗。已有研究表明，let-7a可通过靶向TGF-βR1抑制Smad信号通路，这为多靶点干预OSF提供了可能。尽管目前研究主要在细胞水平进行，但为后续动物实验和临床转化研究奠定了重要基础，对改善OSF患者预后和降低恶性转化风险具有重要价值。