商用ELISA试剂盒与病毒中和试验检测QX株（GI-19型）传染性支气管炎病毒抗体的效能评估

本研究针对QX株传染性支气管炎病毒（IBV）抗体检测的标准化需求，评估了四种商用ELISA试剂盒与病毒中和试验（VN）的检测效能。通过SPF鸡和肉鸡的实验室与田间试验，发现所有ELISA试剂盒均能有效检测候选疫苗诱导的抗体，且ID Screen间接ELISA灵敏度更优。该研究为IBV疫苗免疫监测提供了重要技术参考，发表于《Journal of Virological Methods》。

　　

传染性支气管炎病毒（IBV）是严重危害家禽健康的病原体，其QX株（GI-19型）自21世纪初成为欧亚地区主导流行株。尽管已有多种疫苗，但IBV的高变异性导致疫苗交叉保护有限，且现有抗体检测方法（如基于马萨诸塞血清型的ELISA）对QX株的适用性存疑。Genera公司（克罗地亚）的研究团队在《Journal of Virological Methods》发表论文，系统评估了四种商用ELISA试剂盒（IDEXX、BioChek、ID Screen间接/竞争法）与病毒中和试验（VN）对QX株抗体的检测能力。

研究采用双实验设计：实验1对SPF鸡接种候选疫苗（QX 1285株）或市售疫苗（Poulvac? IB QX、Nobilis? IB Primo QX），采集28天血清和14/21/28天泪液样本；实验2在田间条件下对2万羽肉鸡分组接种候选疫苗与对照疫苗，监测1/22/40日龄抗体动态。通过ELISA（间接/竞争法）检测S/P值或抑制率，VN试验测定中和效价，结合统计学分析比较各组差异。

3.1 实验1结果
泪液ELISA显示，候选疫苗组（G1）在所有时间点的S/P值均显著高于对照组（G4），28天时阳性率达100%（BioChek ELISA）。血清ELISA敏感性较低，但VN试验在70%接种组样本中检出中和抗体，证实疫苗诱导了功能性免疫应答。

3.3 系统免疫
血清抗体水平在接种后28天仍较低，但VN试验检测到显著中和活性（G1平均效价2.9 log₂
），提示ELISA与VN结果不完全一致。泪液与血清VN效价呈正相关（r=0.82），竞争ELISA对血清抗体检出率更高（70% vs 间接ELISA的10%）。

3.4 实验2结果
田间试验中，候选疫苗组（G1）在40日龄时ELISA效价（ID Screen：8273）和VN效价（6.5 log₂
）均显著高于对照疫苗组（p<0.01）。值得注意的是，1日龄雏鸡泪液即存在母源中和抗体（5.2 log₂
），但21天时抗体低谷期仍能提供70%攻毒保护。

讨论与意义
该研究首次系统评估了商用ELISA对QX株IBV的检测效能，揭示ID Screen间接ELISA在低抗体水平下的优势。尽管循环抗体与保护力无绝对相关性，但建立基于本地流行株的抗体基线（如28天泪液S/P>0.2）对免疫监测至关重要。研究还证实候选疫苗QX 1285株诱导的免疫应答优于市售疫苗，为疫苗研发提供了新选择。论文强调需结合黏膜免疫（IgA）与细胞免疫指标（如CD8⁺
T细胞）综合评价保护效力，这一观点对完善IBV防控策略具有指导价值。