急性HIV感染期间血液与淋巴结免疫细胞亚群的动态变化及其临床意义

本研究通过流式细胞术分析泰国RV254队列中急性HIV感染(AHI)患者匹配的PBMCs和LNMCs样本，首次系统揭示了CD4+ /CD8+ T细胞比例失衡、Tfh细胞功能异常及pDC活化等免疫特征在淋巴组织与血液中的差异，为理解HIV早期免疫逃逸机制提供了关键组织学证据。

　　

HIV感染仍是全球重大公共卫生挑战，尽管抗逆转录病毒治疗(ART)能控制病毒复制，但急性感染期(AHI)发生的免疫损伤往往不可逆。特别令人困惑的是，为何机体在病毒暴露后数周内就丧失了免疫控制能力？传统研究多基于血液样本，而作为HIV主要复制场所的淋巴组织却鲜少被探索。这种"以血代组织"的研究模式是否掩盖了关键免疫事件？

来自泰国朱拉隆功大学和美国沃尔特·里德陆军研究所的跨国团队在《Journal of Virus Eradication》发表重要成果。研究人员利用RV254/SEARCH010队列中44例AHI患者（按Fiebig分期）的匹配外周血单核细胞(PBMCs)和淋巴结单核细胞(LNMCs)，结合16例HIV阴性对照和8例慢性感染者(CHI)样本，采用多色流式细胞术系统比较了免疫细胞动态。关键技术包括：1）前瞻性收集AHI各阶段匹配组织样本；2）13色流式抗体panel检测T/B细胞亚群及pDC活化标志物；3）通过Ki-67⁺
Bcl-2^lo
双标量化细胞增殖。

研究结果揭示：

1. CD4⁺
   T细胞耗竭与CD8⁺
   T细胞扩增
   在AHI S3期，PBMCs中CD4⁺
   T细胞频率显著下降(较HIV^-
   p<0.001)，而LNMCs中延迟至S4/5期才出现(p<0.01)。CD8⁺
   T细胞扩增同样呈现"血液早于淋巴结"的模式。CD4:CD8比值在PBMCs中更早出现倒置(r=0.65,p<0.0001)，但LNMCs中该比值始终高于血液。

2. 细胞增殖与杀伤功能
   Ki-67⁺
   Bcl-2^lo
   增殖性CD8⁺
   T细胞在S3期PBMCs中激增，而LNMCs中延迟1-2周。穿孔素(perforin)⁺
   CD8⁺
   T细胞在淋巴组织中的比例虽低于血液，但活化更早(S2期即出现)。

3. Tfh细胞与B细胞异常
   与CHI患者不同，AHI期间循环Tfh(cTfh)和淋巴结Tfh(LN Tfh)均未扩增，且两者无相关性(r=0.02)。B细胞耗竭仅见于血液：PBMCs中静息记忆B细胞(RM, CD21⁺
   CD27⁺
   )在S1-S3期减少50%，而LNMCs中保持稳定。

4. pDC的区室化激活
   pDC在LNMCs中的CD40/CD69/CD86表达早在S2期即显著升高(p<0.001)，而PBMCs中直到S3期才出现CD40上调。

这项研究首次绘制了AHI期间淋巴组织与血液免疫图谱的差异：1）证实CD4⁺
T细胞耗竭存在"血液先行"现象，提示淋巴组织可能通过招募循环细胞暂时维持免疫稳态；2）发现pDC在淋巴结中的早期活化可能通过I型干扰素影响后续T细胞应答；3）揭示B细胞耗竭的血液指标不能反映淋巴组织真实状态，这对疫苗评价具有启示意义。

特别值得注意的是，研究发现AHI期间Tfh细胞未能有效扩增，这与慢性期形成鲜明对比，可能解释了早期抗体应答缺陷的机制。而pDC在淋巴组织的特异性激活模式，为开发靶向先天免疫的干预策略提供了新思路。这些发现挑战了传统血液检测的替代价值，强调组织免疫监测在HIV研究中的不可替代性。

该研究的局限性在于仅使用腹股沟淋巴结，且缺乏ART后的纵向数据。未来结合单细胞测序和空间组学技术，将能更精确解析免疫细胞在淋巴组织中的动态互作网络。