HTLV-1/2多肽筛选推动快速即时检测技术开发：从生物信息学预测到临床应用

针对HTLV-1/2（人类T细胞白血病病毒）感染漏诊率高的问题，研究人员通过生物信息学筛选Env/Gag/Tax蛋白的173条多肽，经免疫印迹和ELISA验证，发现Gag-HTLV-1/2可作为广谱筛查靶点，Tax-HTLV-1与Env-HTLV-2能区分血清型，最终开发出高灵敏度/特异性的即时检测（POCT）技术，目前已在巴西国家卫生监督局（ANVISA）注册，为控制垂直传播和公共卫生政策制定提供新工具。

　　

研究背景
人类T细胞白血病病毒（HTLV-1/2）是一类被忽视的病原体，全球感染人数被严重低估。这类病毒可引发致命性疾病，如成人T细胞白血病和热带痉挛性截瘫，但现有诊断技术存在成本高、耗时长等问题，尤其在资源有限地区难以普及。更严峻的是，母婴垂直传播可能导致新生儿终身携带病毒。巴西作为HTLV-1/2高流行区，亟需开发快速、准确的即时检测（Point-of-care test, POCT）技术以实现早期筛查和疫情控制。

研究设计与方法
由巴西米纳斯吉拉斯联邦大学领衔的研究团队，联合多家机构开展跨学科攻关。研究分为四个阶段：

1. 生物信息学预测：基于GenBank中HTLV-1/2的Env（包膜糖蛋白）、Gag（基质蛋白）和Tax（转录调控蛋白）序列，预测B细胞线性表位；
2. 多肽合成与初筛：合成173条多肽（含重复共279个），通过免疫印迹评估与感染者血清的反应性；
3. 特异性验证：使用巴西三个队列（帕拉州献血者、米纳斯吉拉斯州献血者、圣保罗HIV高危人群）的血清样本，结合商业试剂盒（ELISA/CMIA）和Western blot（WB）确认结果；
4. POCT开发：将优选多肽构建重组多表位蛋白，用于横向流动检测试纸条开发。

关键结果

1. Materials and methods
   研究采用三地血清库（n=未明确），通过对比商业试剂盒与自制ELISA的性能，发现Gag-HTLV-1/2多肽能同时识别两种病毒抗体，而Tax-HTLV-1和Env-HTLV-2可特异性区分血清型。

2. Results
   免疫印迹显示13条多肽（7.5%）具有诊断潜力（图2）。值得注意的是，某些多肽在HIV阳性血清中产生交叉反应，这一发现帮助排除了非特异性候选物。ELISA验证阶段，Gag-HTLV-1的灵敏度达未明确数值，特异性超过未明确百分比。

3. Discussion
   研究首次系统评估HTLV多肽在POCT中的应用价值。通过纳入HIV共感染样本，有效规避了传统检测的假阳性风险。Tax蛋白的型别特异性为区分HTLV-1/2感染提供了新思路。

4. Conclusion
   该研究成功开发出基于多表位蛋白的POCT技术，目前已进入巴西ANVISA注册阶段。其创新性在于：

• 将生物信息学预测与实验验证相结合，缩短研发周期；
• 明确Gag蛋白作为广谱筛查靶点的临床价值；
• 为资源匮乏地区提供可负担的筛查方案。

意义与展望
这项发表于《Journal of Virological Methods》的研究，不仅解决了HTLV诊断的技术瓶颈，更开创了"从硅基预测到床边检测"的转化医学范式。未来可扩展至其他被忽视热带病的快速诊断开发，对实现WHO提出的2030年消除病毒性肝炎等目标具有启示意义。研究团队特别致谢患者家庭的参与精神，这体现了科研伦理中"患