Rab39b缺失通过损害巨自噬（macroautophagy）上调神经毒性α-突触核蛋白（α-synuclein）导致X连锁帕金森病小鼠模型中黑质多巴胺能神经元退变的机制研究

本研究针对X连锁帕金森病（PD）的致病机制，通过构建Rab39b-/Y 小鼠模型，揭示了Rab39b缺失通过损害巨自噬（macroautophagy）导致α-突触核蛋白（α-synuclein）异常积累，进而激活内质网应激（ER stress）、线粒体凋亡通路及神经炎症反应，最终引发黑质（SN）多巴胺能神经元退变。研究证实巨自噬激活剂雷帕霉素（rapamycin）可逆转上述病理过程，为X连锁PD的治疗提供了潜在靶点。

　　

研究背景与意义
帕金森病（PD）是一种以黑质（substantia nigra, SN）多巴胺能神经元退变为核心病理特征的神经退行性疾病。近年来，遗传因素在PD发病中的作用日益受到关注，其中X染色体上的RAB39B基因突变或缺失可导致男性患者罹患X连锁PD。临床研究发现，RAB39B缺失或突变（如T168K、W186X等）患者表现出典型的PD症状和黑质神经元退变，但具体机制尚不明确。α-突触核蛋白（α-synuclein）的异常聚集是PD的重要病理标志，而巨自噬（macroautophagy）是清除异常蛋白的关键途径。然而，RAB39B如何通过调控巨自噬影响α-synuclein稳态，进而导致神经元死亡，仍是未解之谜。

为解决这一问题，长庚大学的研究团队通过构建Rab39b^-/Y
小鼠模型，系统研究了RAB39B缺失对巨自噬、α-synuclein代谢及神经元存活的影响。研究发现发表于《Life Sciences》，不仅揭示了X连锁PD的分子机制，还为靶向巨自噬的治疗策略提供了实验依据。

关键技术方法
研究采用CRISPR/Cas9技术构建Rab39b^-/Y
小鼠模型，通过行为学测试评估运动功能障碍；利用免疫印迹（Western blot）和免疫组化分析黑质区蛋白表达；通过透射电镜观察自噬体和线粒体超微结构；结合ELISA和qPCR检测炎症因子水平；使用雷帕霉素干预以验证巨自噬的调控作用。

研究结果

1. Rab39b^-/Y
   小鼠表现PD样病理特征
   模型小鼠出现运动障碍、黑质多巴胺能神经元丢失及路易小体（Lewy bodies）形成，模拟了人类X连锁PD的病理表型。

2. Rab39b缺失损害巨自噬并上调α-synuclein
   Rab39b^-/Y
   小鼠黑质区Atg3、Atg5、Atg7等自噬相关蛋白表达降低，导致巨自噬功能障碍，进而引起α-synuclein及其寡聚体积累。雷帕霉素可逆转这一过程。

3. α-synuclein激活ER应激与线粒体凋亡通路
   异常积累的α-synuclein定位于内质网（ER）和线粒体，分别触发ER应激（激活CHOP/caspase-12）和线粒体功能障碍（ROS升高、膜电位丧失），最终激活caspase-9/caspase-3凋亡级联反应。

4. 神经炎症加剧神经元损伤
   α-synuclein寡聚体通过激活小胶质细胞和NLRP3炎症小体，促进IL-1β、TNF-α等促炎因子释放，进一步激活MKK4-JNK-c-Jun凋亡通路和RIPK1-RIPK3-MLKL坏死性凋亡途径。

结论与讨论
本研究首次阐明RAB39B缺失通过损害巨自噬导致α-synuclein稳态失衡，进而触发多重致死性通路（ER应激、线粒体凋亡、神经炎症）的级联反应，最终导致黑质多巴胺能神经元退变。这一发现不仅揭示了X连锁PD的核心机制，还提示巨自噬激活剂（如雷帕霉素）可能成为潜在治疗药物。未来研究可进一步探索RAB39B在自噬体形成中的具体分子机制，以及靶向干预上述通路对PD病程的改善作用。