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南极硅藻沉积古DNA(sedaDNA)提取方法的优化及其在古环境重建中的应用
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年06月13日 来源:Marine Micropaleontology 1.5
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本研究针对南极海洋沉积物中硅藻sedaDNA提取效率低下的问题,系统比较了六种提取方法在东西南极两个站点的应用效果。研究发现方法效能主要受采样点(R2 =0.593)和样本年代(R2 =0.401)驱动,其中SiMAG和COM Short方法分别适用于不同区域。该研究为极地古生态系统重建提供了关键方法学支持,成果发表于《Marine Micropaleontology》。
在浩瀚的南极冰层之下,封存着揭示地球气候历史的密码——沉积物中的硅藻化石及其遗传物质。这些单细胞浮游生物对环境变化极为敏感,其硅质外壳和DNA片段就像精密的"环境记录仪"。然而,海洋沉积物中硅藻沉积古DNA(sedaDNA)的提取始终面临严峻挑战:含量极低、高度降解、且易受抑制剂干扰。传统显微镜检测难以识别破碎的硅藻壳体或形态相似的"隐存种"(cryptic species),而sedaDNA技术能突破这些限制,为古海洋生态系统重建提供分子层面的新证据。
澳大利亚研究团队在《Marine Micropaleontology》发表的研究,系统评估了六种sedaDNA提取方法对南极硅藻的回收效率。团队选取东西南极代表性站点U1536C和KC02的六个沉积柱样本,采用基于Armbrecht等(2020)方案的三种改良方法,与Orsi、Rohland的经典方案及Qiagen商业试剂盒进行对比。通过shotgun宏基因组测序,从DNA得率、片段长度分布和物种多样性三个维度进行综合评价。
关键技术包括:1) 东西南极2161-3100米深度的沉积柱采样;2) 六种sedaDNA提取方法的平行比较;3) 采用TapeStation分析100-500 bp特征性aDNA片段;4) 基于宏基因组数据的Bacillariophyta(硅藻门) reads定量分析。
sedaDNA回收效率
结果显示不同方法间存在显著差异:SiMAG方法在西南极U1536C站点表现优异,却在东南极KC02完全失效;COM Short方法则呈现相反的地域适应性。COM QG虽在DNA区域摩尔浓度(nmol/l)检测中领先,但实际硅藻reads回收率不佳。值得注意的是,方法选择对结果的影响(R2
=0.001)远小于采样位置(R2
=0.593)和样本年龄(R2
=0.401)的贡献。
讨论
该研究揭示了极地sedaDNA研究的核心矛盾:标准化需求与地域特异性之间的平衡。西南极站点可能因较高的原生硅藻含量更适合SiMAG的硅基提取,而东南极样品需要COM Short的温和裂解条件。不同方法还显著影响类群丰度评估(χ2
88.04-99,664.17),这对古食物网重建具有重要启示。
结论
研究确立了南极硅藻sedaDNA提取的黄金准则:1) 优先考虑样本地理来源而非通用方案;2) 西南极推荐SiMAG方法,东南极适用COM Short;3) 需结合显微观察验证分子数据。这项成果不仅填补了南大洋硅藻古遗传研究的空白,更为解读百万年尺度上的极地生态系统演变提供了方法学基石。正如研究者强调的,在气候变暖加剧的今天,这些封存在冰芯中的微观DNA档案,将成为预测南极生态响应的关键"基因罗盘"。
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