优化RNA递送效率：NeoLNPTM 转染试剂的关键参数研究与临床应用潜力

本研究针对RNA疗法递送效率低的瓶颈问题，系统评估了Scindy Pharmaceutical开发的NeoLNPTM 转染试剂。通过优化RNA浓度（40-60 ng/μL）、RNA/LNP体积比（1:0.75-1:1）等参数，显著提升蛋白表达水平，为mRNA疫苗、siRNA治疗等应用提供标准化方案。

　　

RNA疗法在COVID-19疫苗成功应用的推动下迎来爆发式发展，但高效递送仍是制约其临床转化的核心难题。传统脂质纳米颗粒(LNP)制备需经历微流控混合、乙醇去除、超滤等多步耗时工艺，且存在转染效率不稳定、悬浮细胞难转染等技术瓶颈。针对这些问题，来自南京大学等机构的研究团队在《Methods》发表论文，系统评估了Scindy Pharmaceutical开发的即用型NeoLNP^TM
转染试剂，为RNA药物研发提供标准化解决方案。

研究采用流式细胞术、荧光显微镜动态监测等技术，在HEK293T、A549等4种细胞系中评估了EGFP-mRNA、Luc-mRNA等不同RNA类型的转染效率。通过动态光散射(DLS)表征颗粒稳定性，系统考察了RNA浓度、电荷比、混合方法等12项关键参数。

【mRNA浓度对转染的影响】
发现40-60 ng/μL为最佳浓度窗口，60 ng/μL时荧光强度达1.72E+06（空白组仅556），但20-100 ng/μL区间差异不显著。

【mRNA/LNP电荷比优化】
1:0.75体积比实现最高表达（1.74E+06），过量LNP（1:1.5）使效率降低38%。

【混合技术对比】
移液混合与3秒涡旋效果相当，但10秒剧烈涡旋导致效率下降8.2%，提示温和混合更利于复合物形成。

【复合物稳定性】
室温储存24小时后粒径仍保持217.2±5.662 nm，PDI<0.2，且转染效率提升78%，突破传统LNP需低温储存的限制。

【细胞类型差异】
在难转染的Jurkat细胞中，1:1比例下仅50%细胞表达EGFP（293T达99.5%），但THP-1细胞展现84%转染率，为免疫细胞治疗提供新可能。

【RNA类型比较】
mRNA转染效率最高（1.70E+06），自扩增RNA(saRNA)达1.20E+06，而环状RNA(circRNA)仅4.96E+05，揭示结构稳定性与翻译效率的负相关。

结论指出，NeoLNP^TM
通过简化制备流程（直接混合即用）、提升稳定性（24小时室温存储）和优化参数体系，显著突破现有技术瓶颈。特别在悬浮细胞转染方面的突破（THP-1细胞84%效率），为CAR-T等细胞疗法开发奠定基础。该研究不仅建立RNA递送的"黄金标准"参数，更推动RNA药物从实验室向临床转化的进程。