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基于重组酶聚合酶扩增(RPA)的烟粉虱MEAM1与MED隐存种快速等温检测技术开发
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年06月14日 来源:Physiology and Molecular Biology of Plants 3.4
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为解决烟粉虱(Bemisia tabaci)隐存种MEAM1(原B型)与MED(原Q型)形态鉴别困难的问题,研究人员开发了靶向mtcox1基因的重组酶聚合酶扩增(RPA)等温检测技术。该技术无需核酸提取和PCR仪,90分钟内可检出10拷贝质控模板和100 pg核酸,为农业害虫防控提供高效分子工具。
烟粉虱(Bemisia tabaci)(半翅目:粉虱科)作为 notorious 的农业害虫,不仅直接危害作物,更是植物病毒传播的"超级媒介"。这个物种复合体包含多个形态难以区分的隐存种(cryptic species),其中MEAM1(原称B型)和MED(原称Q型)的快速鉴别对精准防控至关重要。
研究人员另辟蹊径,利用重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification, RPA),开发出 revolutionary 的现场检测方案。该技术精准锁定线粒体细胞色素c氧化酶亚基1(mtcox1)基因的特异性区域,如同 molecular 指纹般区分两种生物型。最惊艳的是,整个检测过程摆脱了传统PCR对精密仪器的依赖——只需普通加热块,连繁琐的核酸提取步骤都省去了,直接用粉碎的虫体作模板就能在90分钟内获得结果。
实验验证阶段,customized 设计的引物展现出惊人的 discriminative 能力:对目标生物型的检测灵敏度高达10拷贝/反应(人工质粒对照)和100 pg核酸,且与近缘物种 zero 交叉反应。这种堪比 molecular 显微镜的检测精度,让田间工作者能像使用血糖仪般轻松完成烟粉虱生物型鉴定,为制定靶向防控策略赢得 golden 时间窗口。
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