丁香酚通过调控氧化应激、炎症、凋亡与增殖机制在肝细胞癌中的抗癌潜力

本研究揭示了丁香酚（Eugenol）在二乙基亚硝胺（DENA）/乙酰氨基芴（AAF）诱导的肝细胞癌（HCC）模型中的多靶点作用机制。通过体内外实验证实，丁香酚通过下调NF-κB、IL-8、CXCR3等炎症因子，上调Nrf2抗氧化通路，调节Bcl-2/Bax凋亡平衡，并抑制IQGAP1/3、HRAS/KRAS等增殖相关基因，显著改善肝功能指标（ALT/AST/ALP）和肿瘤标志物（AFP/CEA/CA19-9）。该研究为天然化合物防治HCC提供了新的分子靶点和理论依据。

　　

引言

肝细胞癌（HCC）作为全球癌症死亡的主因之一，其发病与慢性肝损伤、肝炎病毒感染及化学致癌物暴露密切相关。二乙基亚硝胺（DENA）作为强效致癌剂，联合促癌剂乙酰氨基芴（AAF）可诱导大鼠HCC模型，模拟人类HCC的病理特征。近年研究发现，氧化应激（ROS累积）和慢性炎症（NF-κB激活）是驱动HCC进展的核心机制，而天然化合物因其多靶点特性成为研究热点。丁香酚作为丁香主要活性成分，既往研究提示其在乳腺癌和肝癌中具有抗氧化、抗炎及促凋亡作用，但其在DENA/AAF诱导HCC中的具体机制尚未阐明。

材料与方法

实验采用Wistar大鼠分为三组：正常对照组、DENA/AAF诱导组（150 mg/kg DENA腹腔注射+20 mg/kg AAF口服）及治疗组（DENA/AAF+20 mg/kg丁香酚）。体外选用HepG2细胞评估细胞毒性（MTT法）和迁移能力（划痕实验）。通过检测血清肝功能酶（ALT/AST/ALP）、肿瘤标志物（AFP/CEA/CA19-9）及肝组织氧化指标（LPO/GSH/SOD/GPx），结合qPCR和Western blot分析关键基因表达，病理切片观察组织学变化。

结果

体外实验
丁香酚以剂量依赖性抑制HepG2细胞活力（IC₅₀
=189.29 μg/mL），72小时划痕实验显示其显著抑制细胞迁移（p<0.05）。

体内效应

1. 肝功能与肿瘤标志物：丁香酚逆转DENA/AAF导致的ALT（升高2.1倍）、AST（1.8倍）及AFP（3.2倍）异常（p<0.05），并降低血清总胆红素（TBIL）水平。
2. 氧化应激调控：治疗组肝组织LPO降低42%，同时提升GSH含量（1.5倍）及SOD/GPx活性（p<0.05），伴随Nrf2表达上调（2.3倍）。
3. 炎症抑制：TNF-α和IL-1β水平分别下降57%和49%，NF-κB、IL-8、CXCR3 mRNA表达显著下调（p<0.01）。
4. 凋亡激活：促凋亡基因Bax、DR4/DR5表达增加（2.1-2.7倍），抗凋亡Bcl-2降低60%，p53和PDCD5表达恢复至近正常水平。
5. 增殖抑制：IQGAP1/3和HRAS/KRAS表达分别降低45-58%，Ki-67蛋白水平下降62%。

病理学验证
DENA/AAF组肝组织呈现肿瘤巢团、炎性浸润及坏死，而丁香酚治疗组肝小叶结构基本完整，仅见散在凋亡小体（染色质凝聚，胞膜起泡）。

讨论

丁香酚的抗HCC作用通过多通路协同实现：

1. 抗氧化防御：激活Nrf2通路增强GSH合成，中和DENA代谢产生的自由基。
2. 抗炎机制：抑制NF-κB信号轴，阻断IL-8/CXCR3介导的肿瘤微环境炎症。
3. 凋亡诱导：通过p53依赖途径上调Bax/DR5，触发线粒体凋亡程序。
4. 增殖阻断：下调IQGAP1/3-RAS-MAPK通路，抑制Ki-67标记的肿瘤细胞分裂。

值得注意的是，丁香酚对IQGAP2（抑癌基因）的上调提示其可能修复细胞迁移调控网络。该研究局限性在于未探讨长期毒性及与其他抗癌药的协同效应。

结论

丁香酚通过"抗氧化-抗炎-促凋亡-抑增殖"多维作用机制，在化学诱导HCC中展现出显著疗效，为开发植物源HCC辅助治疗剂奠定基础。未来需开展临床前药代动力学及剂型优化研究以推动转化应用。