新型灭活油佐剂牛病毒性腹泻病毒三价疫苗对病毒血症及临床症状的保护效果：基于免疫应答与攻毒试验的研究

这篇研究评估了含土耳其地方流行株（TR-21[BVDV-1l ]、TR-26[BVDV-1f ]、TR-15[BVDV-2b ]）的Montanide? ISA 206佐剂灭活三价疫苗对牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的保护效果。通过单次或两次免疫方案，疫苗显著抑制病毒血症（p<0.05），并诱导持续≥7个月的中和抗体（nAb≥8 log2 ），对异源毒株（如BVDV-1a和BVDV-2b）亦具交叉保护。攻毒试验显示，疫苗接种组临床症状和血液学指标显著改善，证实其防控BVDV急性感染的潜力。

　　

引言

牛病毒性腹泻病毒（BVDV）属于黄病毒科（Flaviviridae）瘟病毒属（Pestivirus），是全球畜牧业经济损失的主要病原之一。根据遗传和抗原差异，BVDV分为BVDV-1（Pestivirus bovis）、BVDV-2（Pestivirus tauri）和BVDV-3（Pestivirus braziliense），其中BVDV-1包含24个亚型（1a-1x）。病毒的非致细胞病变型（ncp）生物型可导致持续感染（PI），而致细胞病变型（cp）可能引发黏膜病（MD）。

材料与方法

疫苗设计与动物实验
研究选用6月龄荷斯坦公牛，分为单次免疫组（11头）、两次免疫组（11头）和未免疫对照组（6头）。疫苗含土耳其地方流行株TR-21（BVDV-1_l
）、TR-26（BVDV-1_f
）和TR-15（BVDV-2_b
），病毒滴度分别为10⁶
、10^5.6
和10^5.5
TCID₅₀
/剂，以Montanide ISA 206佐剂（1:1）乳化。

免疫原性与攻毒
免疫后51天，以BVDV-1_l
毒株TR-72（10^6.5
TCID₅₀
）鼻内攻毒，监测14天内临床症状、血液参数、病毒脱落及血清学变化。中和抗体（nAb）通过免疫过氧化物酶单层试验（IPX）和病毒中和试验评估。

结果

免疫应答
两次免疫组在21天即产生高nAb（4.71–8.97 log₂
），对异源株NADL（BVDV-1a）和Gi-II（BVDV-2b）的抗体水平显著高于单次组（p<0.05）。抗体持续≥7个月，且对BVDV-1所有参考株均保持≥3倍保护阈值。

病毒血症抑制
未免疫组100%（4/4）出现病毒血症（RT-PCR Ct值14.12–30），而两次免疫组完全抑制（0/5）。单次组血清抗原阳性率60%（3/5），显著低于对照组75%（3/4）（p<0.05）。

临床与血液学保护
未免疫组75%出现高热（40.9°C）和白细胞减少（降幅47%），而免疫组仅20%短暂发热（≤39.8°C）。血小板减少仅见于未免疫组（降幅37%）。

讨论

含地方流行株的疫苗设计克服了传统BVDV-1a疫苗的局限性。Montanide ISA 206佐剂诱导的长期免疫（≥7个月）和交叉保护，为防控异源毒株提供了新策略。攻毒模型证实，疫苗通过抑制病毒复制和减轻免疫抑制，显著降低临床和经济损失。

结论

该三价灭活疫苗可有效预防BVDV急性感染，其安全性和广谱保护性支持其在疫病净化计划中的应用潜力。