人参皂苷Rb1负载的肽修饰外泌体递送系统逆转非小细胞肺癌免疫治疗获得性耐药的研究

本研究针对PI3K突变型非小细胞肺癌(NSCLC)免疫治疗耐药难题，开发了TMTP1肽修饰的肿瘤源性外泌体(T-exo)负载人参皂苷Rb1(Rb1@T-exo)的新型递送系统。该研究通过体内外实验证实，Rb1@T-exo能有效抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路，促进M1型巨噬细胞极化并增强CD8+ T细胞功能，重塑免疫微环境，显著逆转PD-1/PD-L1抑制剂耐药性。相关成果发表于《Journal of Nanobiotechnology》，为克服肿瘤免疫治疗耐药提供了创新策略。

　　

肺癌是全球癌症死亡的首要原因，其中非小细胞肺癌(NSCLC)占比高达85%。尽管免疫检查点抑制剂(如PD-1/PD-L1抑制剂)的应用为治疗带来突破，但PI3K突变导致的获得性耐药仍是临床重大挑战——仅20%患者对免疫治疗产生持续响应，且多数最终出现耐药。更棘手的是，传统化疗和放疗副作用显著，而CAR-T疗法对实体瘤效果欠佳，这些困境都指向一个核心问题：如何精准逆转肿瘤免疫微环境(TME)的免疫抑制状态？

哈尔滨医科大学肿瘤医院的研究团队将目光投向了传统中药活性成分人参皂苷Rb1与纳米技术的结合。Rb1虽具有抗肿瘤和免疫调节作用，但存在溶解度差、生物利用度低等缺陷。与此同时，肿瘤干细胞(CSC)来源的外泌体(T-exo)因其天然靶向性和生物相容性成为药物递送的新宠。研究者创新性地采用电穿孔技术将Rb1装载至经TMTP1肽修饰的T-exo中，构建了Rb1@T-exo递送系统，相关成果发表在《Journal of Nanobiotechnology》。

研究团队运用了多项关键技术：通过无血清悬浮培养富集A549细胞来源的肿瘤干细胞；采用电穿孔法实现Rb1的高效装载；建立PI3K E545K突变型NSCLC皮下移植瘤和骨转移模型；利用转录组测序和生物信息学分析筛选关键差异基因；采用流式细胞术评估免疫细胞亚群变化。

制备与表征肽修饰Rb1@T-exo
透射电镜显示Rb1@T-exo呈典型杯状形态，平均粒径107.4 nm，药物装载量达8.522 μg/mg。体内药代动力学显示其半衰期比游离Rb1延长33倍，肿瘤靶向性验证实验中，Cy5.5标记的Rb1@T-exo在肿瘤部位荧光强度较普通外泌体提高3倍（

）。

抑制PI3K突变型NSCLC进展
在皮下移植瘤模型中，Rb1@T-exo治疗组肿瘤体积减少68%（p<0.001），Ki67表达下降82%。骨转移模型μCT显示其显著抑制溶骨性病灶（

）。安全性评估证实其对主要器官无毒性，血生化指标均正常。

逆转免疫治疗耐药机制
转录组分析发现223个差异表达基因(DEGs)，其中PI3K/AKT/mTOR和PD-1/PD-L1通路富集最显著（

）。Western blot证实Rb1@T-exo+Nivolumab组p-AKT水平降低91%，协同抑制关键信号节点（

）。

重塑免疫微环境
流式细胞术显示治疗组M1型巨噬细胞(CD86⁺
)比例增加3.5倍，M2型(CD206⁺
)减少70%（

）。CD8⁺
T细胞中IFN-γ⁺
Granzyme B⁺
亚群扩增4倍，细胞毒性提升82%（

）。

这项研究开创性地将中药活性成分与智能递送系统结合，其科学价值体现在三方面：首先，阐明PI3K突变通过持续激活PI3K/AKT/mTOR通路导致免疫耐药的分子机制；其次，证实TMTP1肽修饰可突破外泌体靶向递送的技术瓶颈；更重要的是，首次揭示Rb1通过"双通路调控"发挥作用——既直接抑制肿瘤信号转导，又间接激活抗肿瘤免疫。临床转化方面，该策略为PD-1耐药患者提供了可个体化应用的解决方案，且外泌体载体的低免疫原性使其具有良好安全性。未来研究可进一步优化外泌体规模化生产工艺，并探索该平台在其他耐药实体瘤中的应用潜力。