miR-106b-5p通过抑制TGF-β/Smad通路改善慢性肾脏病进展的机制研究

本研究针对慢性肾脏病（CKD）进展中炎症与纤维化调控机制不明的关键问题，由黑龙江中医药大学附属第二医院团队开展miR-106b-5p靶向TGF-β/Smad通路的作用研究。通过临床队列与细胞实验证实，miR-106b-5p可通过直接抑制TGFBR2/SMAD2/3表达减轻肾小管上皮细胞（HK-2）损伤，为CKD治疗提供新靶点。

　　

慢性肾脏病（CKD）作为全球公共卫生挑战，其高发病率与不可逆的肾功能衰退始终困扰着临床治疗。尽管已知转化生长因子-β（TGF-β）信号通路是肾纤维化的核心驱动因素，但如何精准调控该通路仍存空白。近年来，微小RNA（miRNA）在疾病调控中的重要作用被逐步揭示，其中miR-106b-5p在多种病理过程中表现出抗炎与抗纤维化潜力，但其在CKD中的具体机制尚未阐明。这一科学问题引起了黑龙江中医药大学附属第二医院Qihao Ma、Danan Sun等研究者的关注。

为探究miR-106b-5p的临床意义与分子机制，研究者首先建立了150例CKD患者与100例健康人的队列，按KDIGO指南进行肾功能分期。通过RT-qPCR检测发现，miR-106b-5p表达水平随CKD进展呈阶梯式下降（G1-G5期p<0.001），且与估算肾小球滤过率（eGFR）显著正相关（r=0.832）。更关键的是，ELISA显示血清TGF-β1水平与miR-106b-5p呈负相关（r=-0.802），提示二者可能存在调控关系。

在机制研究中，团队采用脂多糖（LPS）诱导的HK-2细胞损伤模型，通过CCK-8和流式细胞术证实：过表达miR-106b-5p可逆转LPS导致的细胞活力下降（p<0.01）并抑制凋亡（p<0.01）。进一步通过双荧光素酶报告基因实验锁定miR-106b-5p直接靶向TGF-β受体II型（TGFBR2）及其下游效应分子SMAD2/3的3'-UTR区域。当miR-106b-5p被人工上调时，TGFBR2/SMAD2/3的mRNA表达显著受抑（p<0.01），同时细胞上清液中促炎因子IL-6、TNF-α水平降低40%以上。

关键技术方法包括：1）临床队列分析（150例CKD患者血清样本）；2）LPS诱导的HK-2细胞炎症模型；3）miRNA mimics/inhibitors转染技术；4）双荧光素酶报告基因验证靶点；5）流式细胞术检测凋亡率。

研究结果

临床数据比较
CKD患者血脂代谢指标（TC、LDL-C等）显著异常（p<0.01），但基础疾病分布无组间差异，排除了混杂因素影响。

miR-106b-5p与eGFR相关性

G5期患者miR-106b-5p表达仅为对照组的28%，且与eGFR下降同步（p<0.001）。

炎症因子调控
miR-106b-5p与IL-6（r=-0.775）、TNF-α（r=-0.764）等呈强负相关，证实其抗炎作用。

细胞实验验证

过表达miR-106b-5p使LPS处理的HK-2细胞存活率提升1.8倍（p<0.01），凋亡率降低52%。

通路机制解析

双荧光素酶实验证实miR-106b-5p直接结合TGFBR2（荧光活性降低67%）、SMAD2/3（降低58%-61%）。

结论与意义

该研究首次阐明miR-106b-5p通过靶向抑制TGFBR2/SMAD2/3轴减轻CKD进展的分子机制，其价值体现在：1）为CKD早期诊断提供新型循环标志物；2）揭示miRNA-TGF-β串扰调控网络；3）提出通过表观遗传干预延缓肾纤维化的治疗策略。研究者特别指出，相较于传统TGF-β抑制剂可能引发的全身毒性，miR-106b-5p的天然负调控特性更具临床应用安全性。这些发现发表于《Hereditas》，为开发精准肾病疗法奠定理论基础。