综述：细胞外囊泡在胰腺癌精准诊断中的应用进展

（推荐语）本综述系统阐述了细胞外囊泡(EVs)作为新型液体活检标志物在胰腺癌诊断中的潜力，重点解析了EVs携带的RNA(miRNA/circRNA/lncRNA)、蛋白(GPC1/CD63/EphA2)及DNA(KRAS/TP53突变)等多组学标志物的诊断价值，提出多标记联合检测与人工智能(AI)辅助分析是未来突破临床转化瓶颈的关键方向。

　　

概述

胰腺癌作为恶性程度最高的肿瘤之一，5年生存率仅12.8%，早期诊断困难是影响预后的关键因素。传统依赖影像学与血清CA19-9检测的方法存在灵敏度低、特异性不足等局限。近年来，细胞外囊泡(EVs)因其携带母细胞特征性生物分子而成为液体活检新星，在胰腺癌诊断中展现出独特优势。

EVs的生物学特性

EVs是由细胞分泌的30-2000 nm膜性囊泡，按起源分为外泌体、微泡和凋亡小体三类。外泌体通过ESCRT依赖或非依赖途径形成，富含四跨膜蛋白(CD63/CD81)；微泡直接由质膜出芽产生；凋亡小体则源于程序性死亡。EVs的分离技术包括超速离心、密度梯度离心和新兴的EXODUS自动化系统，但标准化仍是临床应用的挑战。

EV生物标志物的诊断价值

RNA标志物

• miRNA：miR-21和miR-10b在胰腺癌EVs中显著高表达。miR-21诊断特异性可达100%，而miR-10b与肿瘤侵袭性正相关。11-miRNA组合联合CA19-9时诊断准确率达97%。
• circRNA：环状结构赋予其稳定性，hsa_circ_0006220与hsa_circ_0001666联合检测AUC达0.884，且与CA19-9水平显著相关。
• lncRNA：8种lncRNA组合在501例样本中AUC>0.93，对I/II期癌症检出率优于CA19-9。

蛋白质标志物

• GPC1：首个被报道的EV标志物，初研显示诊断准确率100%，但后续研究灵敏度波动较大（30%-100%）。
• CD63：与肿瘤负荷动态相关，术后水平迅速下降，联合CA19-9时AUC提升至0.903。
• EphA2：光敏磁珠检测显示其表达与肿瘤进展正相关，与CA19-9联用AUC达0.958。

DNA突变

KRAS突变在EVs中检出率（66.7%-85%）显著高于游离DNA（30.8%-57.9%），TP53和SMAD4突变可辅助预后评估。

挑战与展望

当前EV诊断面临分离技术成本高、标志物异质性大等瓶颈。未来需聚焦：

1. 多组学整合：结合基因组、蛋白质组和脂质组数据提升标志物特异性；
2. AI驱动：机器学习算法优化多参数诊断模型；
3. 临床验证：开展大规模队列研究验证标志物组合的稳健性。

随着单外泌体分析等技术的突破，EVs有望成为胰腺癌早期筛查的变革性工具，推动精准医疗发展。