调节性T细胞调控CD8+ T细胞肿瘤浸润的亲和力阈值：低亲和力疫苗联合Treg耗竭的免疫治疗新策略

本研究针对肿瘤微环境中低亲和力T细胞功能受限的难题，通过病毒样颗粒(VLP)疫苗平台结合调节性T细胞(Treg)耗竭策略，揭示了Treg通过设定亲和力阈值抑制CD8+ T细胞抗肿瘤活性的新机制。研究发现低亲和力疫苗Qβ-A4Y联合抗CD25单抗可显著增强T细胞浸润深度与空间聚集性，并诱导交叉反应性T细胞，为突破肿瘤免疫耐受提供了创新性治疗路径。

　　

肿瘤免疫治疗面临的核心挑战在于：尽管肿瘤相关抗原(TAA)能被T细胞识别，但多数T细胞受体(TCR)对这类抗原的亲和力较低，且受到免疫抑制性微环境的进一步制约。其中，调节性T细胞(Treg)被证实是抑制抗肿瘤免疫的关键因素，但其对低亲和力T细胞功能的调控机制尚不明确。瑞士伯尔尼大学的研究团队在《npj Vaccines》发表的研究，创新性地将病毒样颗粒疫苗技术与Treg耗竭策略相结合，揭示了Treg通过设定"亲和力阈值"限制低亲和力T细胞功能的分子机制。

研究采用Qβ病毒样颗粒(VLP)装载TLR9激动剂CpG和模型抗原A4Y（LCMV糖蛋白p33的低亲和力变体）构建疫苗体系。通过流式细胞术检测Tetramer⁺
T细胞、CFSE体内杀伤实验评估交叉反应性，结合深度学习(DL)组织病理分析技术，系统解析了Treg耗竭对T细胞空间分布和功能的影响。

Limited cross-reactivity of the low-affinity A4Y peptide
研究发现A4Y与原始p33肽段的交叉反应性不足5%，且诱导的T细胞对p33靶标几乎无杀伤活性。通过SDS-PAGE和琼脂糖电泳验证的Qβ-A4Y疫苗虽能激活特异性T细胞，但无法控制表达p33的B16F10黑色素瘤生长。

Low-affinity vaccine induces a systemic T cell response but fails to hinder the progression of B16F10p33 melanoma
尽管Qβ-A4Y疫苗能诱导外周血2-9%的A4Y特异性CD8⁺
T细胞扩增，但肿瘤内T细胞浸润效率仅为高亲和力疫苗Qβ-p33的30%，证实低亲和力T细胞存在肿瘤屏障。

Treg depletion enables in vivo lytic CD8⁺
T cell responses
突破性发现出现在联合抗CD25单抗治疗组：Treg耗竭使肿瘤浸润CD8⁺
T细胞密度增加3倍，83%的小鼠实现长期无瘤生存。深度学习组织分析显示，治疗组T细胞与血管平均距离增加47μm，相邻T细胞间距缩短62%，表明Treg耗竭显著改善T细胞迁移能力和空间分布。

Enhanced tumor infiltration by low-affinity T cells
人工智能定量病理学揭示，联合治疗组肿瘤坏死区域减少68%，CD8⁺
T细胞在肿瘤核心区的密度增加2.5倍。CD103⁺
CD69⁺
组织驻留记忆T细胞(T_RM
)比例达4.28%，为长期免疫记忆奠定基础。

Depletion of Tregs enhances cross-reactivity
意外发现是Treg耗竭使A4Y特异性T细胞对p33的交叉反应性提升至15%，提示Treg选择性抑制低亲和力T细胞的交叉识别能力。在多靶点疫苗(MTV)实验中，Treg耗竭同样使针对PMEL、MTC-1等6种TAA的免疫应答增强。

该研究首次阐明Treg通过设定"亲和力阈值"调控肿瘤免疫应答的分子机制：1）Treg选择性抑制低亲和力T细胞的激活和肿瘤浸润能力；2）耗竭Treg可突破亲和力限制，使低亲和力T细胞获得深度浸润和持久抗肿瘤活性；3）该策略能增强对天然TAA的免疫识别。这些发现为开发基于低亲和力T细胞的个性化疫苗提供了理论依据，特别是针对免疫原性较弱的实体瘤。通过将病毒样颗粒疫苗技术与现有免疫检查点抑制剂联用，有望突破当前肿瘤免疫治疗的疗效瓶颈。