ZNF432通过促进UPF1泛素化诱导细胞凋亡抑制子宫内膜癌进展的机制研究

本文揭示了锌指蛋白432（ZNF432）在子宫内膜癌（EC）中的抑癌机制：通过生物信息学分析和功能实验证实ZNF432低表达与EC进展相关，其过表达可显著抑制EC细胞增殖并诱导凋亡。研究发现ZNF432与RNA解旋酶UPF1相互作用，增强UPF1泛素化降解，进而下调促生存因子（如Bcl-2）并激活凋亡通路（如Bax/caspase-3）。动物实验进一步验证ZNF432对肿瘤生长的抑制作用，为EC靶向治疗提供新思路。

　　

ZNF432通过UPF1泛素化抑制子宫内膜癌的分子机制

Abstract
子宫内膜癌（EC）作为全球常见妇科恶性肿瘤，其发病机制与泛素化调控密切相关。本研究首次发现锌指蛋白ZNF432在EC组织中显著低表达，并通过促进UPF1泛素化降解发挥抑癌作用。

Introduction
EC年发病率达14.2万例，分子分型包括I型（子宫内膜样腺癌）和II型（浆液性/透明细胞亚型）。泛素化通过调控细胞周期、DNA修复等过程参与肿瘤发生，而UPF1作为RNA监视因子（NMD核心组分）在mRNA稳定性调控中具有双重作用。TCGA数据分析显示ZNF432表达与EC分期呈负相关，提示其潜在抑癌功能。

Materials and methods
采用TCGA和BEST数据库分析ZNF432表达谱，Ishikawa细胞系（ZNF432最低表达）被选为模型。通过CRISPR/Cas9构建ZNF432敲除株，pcDNA3.1载体实现过表达。CCK-8检测增殖，流式细胞术分析凋亡，裸鼠移植瘤实验验证体内效果。RIP和Western blot揭示ZNF432-UPF1互作，MG132处理证实泛素化机制。

Results

1. ZNF432在EC中低表达：TCGA显示ZNF432在EC组织表达量仅为正常组织的30%（P<0.001），Ishikawa细胞系中mRNA水平降低5.8倍（图1E-F）。
2. 抑制增殖促凋亡：过表达ZNF432使细胞倍增时间延长至48小时（对照24小时），凋亡率提升3.2倍；EdU阳性细胞减少60%（图2C-E）。WB显示Bax上调2.1倍，Bcl-2下调70%（图2H）。
3. 体内抑瘤效应：裸鼠模型中，ZNF432组肿瘤体积缩小58%（P<0.01），Ki67阳性细胞减少42%（图3F-G）。
4. UPF1泛素化机制：RIP证实ZNF432与UPF1直接结合（R=0.253），过表达使UPF1蛋白半衰期从12小时缩短至4小时（图6E）。MG132处理可逆转UPF1降解，K48连接型泛素化增加3.5倍（图6C-D）。

Discussion
ZNF432通过E3连接酶样功能促进UPF1的K48位泛素化降解，解除UPF1对促生存因子（如LINC00963）的稳定作用，最终激活caspase-3依赖性凋亡通路。该发现为EC的分子分型补充了新标志物，其调控网络涉及：

• 表观遗传层面：ZNF432可能招募泛素连接酶复合物（如CRL家族）
• 转录后调控：UPF1降解影响NMD靶mRNA（如p53异构体）
• 代谢重编程：Bcl-2/Bax比例改变导致线粒体膜电位下降

Conclusion
研究阐明ZNF432-UPF1轴在EC中的关键作用，为开发基于泛素化调控的靶向药物（如蛋白酶体抑制剂联合疗法）提供理论依据。局限性包括样本量较小（N=3）及未解析ZNF432特异性识别UPF1的结构域。