基于异源合成T3SS的减毒杀鲑气单胞菌二价疫苗对淡水鱼病原体的高效免疫保护研究

本研究针对水产养殖中爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）和杀鲑气单胞菌（Aeromonas salmonicida）引发的细菌性疾病，利用光杆菌（Photorhabdus luminescens）的III型分泌系统（T3SS）在减毒杀鲑气单胞菌DBFF01中异源表达，构建了递送迟缓爱德华氏菌GAPDH抗原的二价疫苗。实验证实该疫苗能100%保护罗非鱼免受致死性E. tarda攻击，显著提升先天免疫酶活性、血清IgM及促炎细胞因子（IL-6、TNF-α、IFN-α）水平，为水产疫苗开发提供了安全高效的新策略。

　　

水产养殖业面临细菌性疾病的严峻挑战，其中爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）和杀鲑气单胞菌（Aeromonas salmonicida）是导致鱼类出血性败血症和疖疮病的主要病原体。传统抗生素滥用引发耐药性和环境问题，而现有疫苗存在抗原降解、免疫原性不足等缺陷。湖南师范大学的研究团队创新性地利用光杆菌TT01的III型分泌系统（T3SS），在无致病性的杀鲑气单胞菌DBFF01中实现异源生物合成，构建了能递送爱德华氏菌GAPDH抗原的二价疫苗。该研究发表于《Aquaculture》，为解决水产疫苗开发的关键技术瓶颈提供了新思路。

研究采用以下核心技术：1）通过重组工程技术将32 kb的T3SS基因簇转入杀鲑气单胞菌DBFF01；2）将爱德华氏菌GAPDH与效应蛋白LopT的N端转运信号融合，并共表达伴侣蛋白SlcT；3）以罗非鱼和鲤鱼为模型，通过浸浴接种评估免疫保护效果；4）检测先天免疫酶活性、血清IgM及细胞因子（IL-6、TNF-α、IFN-α）水平。

T3SS from P. luminescens TT01 can functionally biosynthesize in A. salmonicida DBFF01
研究证实异源合成的T3SS能在杀鲑气单胞菌中保持功能活性，通过Western blot和荧光显微镜观察到GAPDH被有效递送至鲤鱼上皮细胞（EPCs），为后续疫苗设计奠定基础。

Discussion
疫苗免疫组在致死量E. tarda EIB202攻毒试验中实现100%相对存活率，且重组菌株能在鱼体组织定植而不引发病理损伤。免疫指标显示，该疫苗能显著激活抗原呈递细胞（APC），提升溶菌酶、超氧化物歧化酶等先天免疫酶活性，并诱导Th1型免疫应答。

Conclusions
该研究首次证明异源T3SS在减毒杀鲑气单胞菌中的功能性应用，其递送的rGAPDH抗原可同时抵御两种主要水产病原体。这种策略避免了传统亚单位疫苗的蛋白降解问题，且浸浴接种方式适合大规模养殖应用。研究为开发多价水产疫苗提供了通用平台，对推动绿色养殖具有重要意义。