新型甲基丙烯酸十二烷基甲基氨基乙酯（DMAEM）抑制白色念珠菌-粪肠球菌双菌生物膜及破骨细胞活性的机制研究

针对根尖周炎治疗中粪肠球菌（E. faecalis）与白色念珠菌（C. albicans）双菌生物膜耐药性及骨破坏难题，研究人员通过合成DMAEM单体及改性根管封闭剂，发现其可显著抑制双菌生物膜生物量（降幅26.3%-51.3%）、下调毒力基因表达，并抑制81%破骨细胞活性（p<0.05），为开发新型根管治疗材料提供理论依据。

　　

根尖周炎是口腔常见疾病，其核心病理过程是微生物感染引发的牙槽骨破坏。尽管现代根管治疗（RCT）成功率已达85%-90%，但粪肠球菌（E. faecalis）和白色念珠菌（C. albicans）形成的双菌生物膜因其耐药性强、能激活破骨细胞导致治疗失败。这两种病原体在根管再感染病例中检出率极高，其共生生物膜比单菌膜厚1.5倍（p<0.05），且能耐受饥饿、机械剪切和杀菌剂。更棘手的是，它们分泌的毒力因子会刺激巨噬细胞M1型极化，扩大根尖区骨吸收范围。传统抗菌材料在pH中性环境中失效，而口腔感染局部常呈酸性，这一矛盾亟待解决。

针对这一临床痛点，中国研究人员在《Archives of Oral Biology》发表研究，创新性地将pH响应型单体甲基丙烯酸十二烷基甲基氨基乙酯（DMAEM）应用于根管治疗领域。该团队通过合成DMAEM单体及含DMAEM的实验性根管封闭剂，采用生物膜定量（结晶紫染色）、扫描电镜（SEM）、共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）、RT-qPCR（实时定量PCR）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色等技术，系统评估了其对双菌生物膜及破骨细胞的抑制作用。

DMAEM单体减少双菌生物膜生物量
研究发现，DMAEM在8-256 μg/mL浓度范围内可使双菌生物膜生物量降低26.3%-51.3%。8 μg/mL剂量即能将E. faecalis存活率降至77.4%（p<0.001），并显著下调其毒力基因cylA、gelE表达。更惊人的是，该单体使C. albicans菌丝态比例从50%骤降至0%（p<0.0001），SEM显示生物膜结构明显疏松。

含DMAEM根管封闭剂的生物安全性及骨保护效应
改性封闭剂中DMAEM含量≤2.5%时，其浸提液细胞相容性良好（CCK-8检测）。TRAP染色显示，改性材料使破骨细胞活性抑制率提升81.0%（p<0.05），流式细胞术证实其通过下调核因子κB受体活化因子配体（RANKL）通路实现骨保护。

讨论与意义
该研究首次揭示DMAEM通过pH依赖性质子化机制（酸性环境下转化为季铵盐结构），同步破坏微生物膜结构和宿主骨破坏通路。其双重作用机制表现为：酸性感染微环境中，质子化DMAEM靶向E. faecalis的CHK1双组分系统，干扰毒力基因转录；同时抑制C. albicans形态转换，阻断其侵袭性菌丝形成。在宿主层面，DMAEM通过调控RANKL/OPG（骨保护素）平衡，遏制破骨细胞分化。这种"抗菌-抗骨吸收"双效协同策略，为开发新一代智能响应型根管治疗材料奠定基础。

研究局限性在于尚未开展大型动物实验验证长期疗效，但现有数据已充分证明DMAEM改性材料在根尖周炎治疗中的转化潜力。该成果不仅为临床难治性根尖周炎提供解决方案，其pH响应特性更为其他感染性疾病材料设计提供新思路。