酶解优化预处理甘蔗渣促进巨大芽孢杆菌PNCM 1890生产聚羟基丁酸酯(PHB)

【字体: 时间:2025年06月16日 来源:Biocatalysis and Agricultural Biotechnology 3.4

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  为解决传统塑料污染问题,研究人员通过响应面法优化甘蔗渣酶解工艺,显著提升还原糖产量(0.46 g/g干生物质),并利用巨大芽孢杆菌PNCM 1890发酵获得6.11 g/L PHB,为农业废弃物资源化及生物塑料低成本生产提供新策略。

  

全球塑料污染危机日益严峻,传统石油基塑料难以降解,导致生态环境持续恶化。聚羟基脂肪酸酯(PHA)作为可生物降解的微生物聚酯,尤其是聚羟基丁酸酯(PHB),因其性能接近聚丙烯而备受关注。然而,高昂的生产成本阻碍其商业化,主要源于依赖纯糖类碳源。如何利用廉价可再生资源(如农业废弃物)生产PHB成为研究热点。甘蔗渣作为糖业副产物,富含纤维素(43.6%)和半纤维素(33.8%),是理想的低成本原料。但木质纤维素结构复杂,需通过预处理-酶解-发酵三步转化,其中酶解效率直接影响糖产量和后续PHB合成。

为突破这一瓶颈,研究人员聚焦于优化甘蔗渣酶解工艺。通过数值因子实验和响应面法(RSM),系统评估固体负载量、酶用量和水解时间对还原糖产量(RSY)的影响。研究发现,酶用量(102.98 FPU/g)和水解时间(70.44 h)对RSY呈正向效应,而固体负载量(4.94%)过高会抑制糖释放。优化后RSY达0.46 g/g干生物质,较前人研究显著提升。进一步利用巨大芽孢杆菌PNCM 1890发酵优化水解液,20小时内PHB浓度达6.11 g/L,且菌株优先利用葡萄糖而非木糖。

关键实验技术

  1. 甘蔗渣预处理:采用蒸汽爆破-稀H2
    SO4
    序贯法(Barrameda等,2023);
  2. 酶解优化:基于中心复合设计的响应面法(RSM)分析三因素交互作用;
  3. 发酵监测:通过高效液相色谱(HPLC)定量PHB产量及糖消耗动态。

研究结果

  1. 预处理原料特性:甘蔗渣经切割(0.5 mm)和60-70°C烘干后,纤维素暴露度提高;
  2. 酶解参数影响:ANOVA显示酶用量(p<0.01)和水解时间(p<0.05)为显著性变量;
  3. 发酵性能:PHB产量达6.11 g/L,占细胞干重49.31%,与Burkholderia sp. F24(Lopes等,2014)相当。

结论与意义
该研究首次将本地甘蔗渣与巨大芽孢杆菌PNCM 1890整合为PHB生产体系,通过精准优化酶解步骤,实现还原糖产量和PHB浓度的双重突破。相比模拟水解液(Da?ez等,2020),实际水解液的直接应用更具工业可行性。研究成果为菲律宾等甘蔗产区提供了农业废弃物高值化方案,推动生物塑料从实验室走向规模化生产。未来需进一步优化菌株代谢通路(如增强木糖利用效率)以提升经济性。论文发表于《Biocatalysis and Agricultural Biotechnology》,为可持续材料领域贡献重要数据。

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