CLEC5A通过调控钙调磷酸酶/NFATc1信号通路抑制骨肉瘤生长与转移的机制研究

为解决骨肉瘤（OS）高转移性导致的治疗难题，研究人员聚焦C型凝集素域家族5成员A（CLEC5A）在OS中的作用机制。通过生物信息学分析、基因敲除与过表达实验，发现CLEC5A通过抑制钙调磷酸酶（calcineurin）/NFATc1信号通路，显著降低OS细胞增殖和转移能力。该研究为OS的预后预测和靶向治疗提供了新思路。

　　

骨肉瘤（OS）是儿童和青少年最常见的恶性骨肿瘤，其高转移性导致患者5年生存率不足20%，尤其是肺转移成为治疗的主要障碍。尽管手术和化疗技术不断进步，但针对转移性OS的有效靶点仍稀缺。近年来，免疫调节分子在肿瘤中的作用备受关注，其中C型凝集素域家族5成员A（CLEC5A）在感染和炎症中的功能已被广泛研究，但其在OS中的角色却如同一片未被开垦的荒地。更引人深思的是，CLEC5A在胃癌、胶质瘤等癌症中表现为促癌因子，而在OS中却呈现相反的表达模式——这种矛盾的生物学行为背后，究竟隐藏着怎样的调控机制？

安徽医科大学第一附属医院的研究团队通过分析GSE21257数据集，首次发现CLEC5A在转移性OS组织中表达显著降低。他们利用短发夹RNA（shRNA）构建CLEC5A稳定敲除的MG-63和143B细胞系，结合过表达实验，揭示CLEC5A通过抑制钙调磷酸酶（calcineurin）活性，阻断转录因子NFATc1的核转位，从而下调基质金属蛋白酶（MMPs）表达，最终抑制OS细胞增殖和转移。这项发表于《Experimental Cell Research》的研究，为OS的免疫治疗提供了全新靶点。

关键技术包括：基于GEO数据库的生物信息学筛选、Western blot和RT-qPCR验证基因表达、shRNA介导的基因敲除、细胞迁移侵袭实验（Transwell）、钙调磷酸酶活性检测以及免疫荧光观察NFATc1核转位。临床样本来自6例OS患者（含转移与非转移组）和3例创伤患者的正常骨组织。

临床样本和细胞系
研究收集了转移与非转移OS患者的组织样本，通过对比发现CLEC5A在转移组中表达更低。两种OS细胞系（143B和MG-63）的实验验证了这一趋势。

基因筛选和验证
GSE21257数据分析鉴定出139个差异基因，其中CLEC5A与OS预后显著相关。实验证实CLEC5A低表达促进细胞增殖和迁移，而过表达则产生相反效果。

讨论
CLEC5A作为OS的新型抑癌因子，其作用机制不同于其他癌症。该研究首次阐明CLEC5A-calcium-calcineurin-NFATc1轴在OS中的调控网络，解释了CLEC5A如何通过抑制NFATc1核转位来阻断MMPs介导的侵袭过程。

结论部分强调，CLEC5A的表达水平可作为OS转移风险的预测标志物，而针对该通路的干预（如钙调磷酸酶抑制剂）可能成为治疗新策略。作者团队指出，这项发现不仅填补了OS免疫微环境研究的空白，更为重要的是，为开发针对转移性OS的精准疗法提供了理论依据。研究局限性在于样本量较小，未来需要扩大临床验证和动物实验。