澳大利亚悉尼地区棘阿米巴角膜炎的临床特征、基因型分布及内共生菌研究：一项转诊眼科医院的流行病学调查

本研究针对棘阿米巴角膜炎(AK)这一新兴角膜感染疾病，通过前瞻性病例系列研究揭示了悉尼地区AK患者的临床特征、流行基因型及内共生菌携带情况。研究人员在悉尼眼科医院收集21例AK患者的角膜拭子及家庭水样，采用培养、PCR和测序技术鉴定出T4基因型为优势菌株（角膜样本28.6%，水样44.4%），并首次发现20%分离株携带胞内细菌（含铜绿假单胞菌）。研究证实接触镜佩戴与水源暴露是主要风险因素，为临床诊疗和公共卫生防控提供了重要依据。

　　

在澳大利亚温暖潮湿的沿海城市悉尼，一种被称为棘阿米巴角膜炎(Acanthamoeba keratitis, AK)的角膜感染正悄然成为威胁视力的隐形杀手。这种由自由生活的棘阿米巴原虫引起的感染，常被误诊为单纯疱疹病毒性角膜炎，导致治疗延误。更令人担忧的是，随着接触镜佩戴者的增加，以及人们在游泳、淋浴时不当使用接触镜的行为，AK发病率呈现上升趋势。然而，澳大利亚特别是悉尼地区的AK流行病学特征、病原体基因型分布及其与家庭供水系统的关联仍缺乏系统研究。

悉尼眼科医院与相关科研机构的研究团队开展了为期16个月的前瞻性研究，通过对21例AK患者角膜样本和家庭水样的多维度分析，揭示了T4基因型在临床和环境样本中的绝对优势地位。研究不仅证实了接触镜使用与水源暴露的协同风险，还首次在澳大利亚AK病例中发现了携带胞内细菌（包括机会致病菌铜绿假单胞菌）的棘阿米巴分离株。这些发现为理解AK的发病机制和优化诊疗策略提供了新视角，相关成果发表在《IJID Regions》期刊。

研究采用非营养性琼脂(NNA)培养结合热灭活大肠杆菌饲喂技术分离棘阿米巴，通过18S rRNA基因测序进行基因分型。运用荧光原位杂交(FISH)和透射电镜(TEM)鉴定胞内细菌，并结合临床裂隙灯检查和共聚焦显微镜(IVCM)实现病原体可视化。来自悉尼大都会区21例AK患者的角膜拭子与9例家庭水样构成主要研究样本。

临床特征分析显示，患者平均年龄40.7±12.3岁，66.7%以眼痛为首发症状。接触镜佩戴者占57.1%（8/14），其中62.5%有游泳或淋浴时佩戴镜片的行为。通过IVCM观察到8-22 μm的双壁囊肿，呈现特征性的高反射中心与低折射壁结构。治疗方面，聚六亚甲基双胍(PHMB)是主要用药，中位疗程达12周。

基因分型研究取得突破性发现：所有10个成功分离株（6例角膜、4例水样）均属T4基因型，进一步分为T4A、T4D、T4E和T4F亚型。系统发育分析显示，两名患者的角膜与水样分离株具有高度同源性，暗示家庭供水可能是感染源。这一发现强化了避免接触镜接触自来水的公共卫生建议。

内共生菌研究揭示，20%分离株携带胞内细菌。FISH和TEM证实，水样分离株AK1-H₂O携带铜绿假单胞菌，细菌呈现杆状与球状混合形态，分布于胞质和吞噬泡内。值得注意的是，携带内共生菌的患者就诊延迟更显著（症状持续30天），且治疗后遗留角膜瘢痕。

讨论部分强调了三方面重要意义：首先，T4基因型的绝对优势与其特殊的致病因子（如MBP和SAP基因）相关，这解释了其在AK中的临床优势地位。其次，家庭供水系统与临床分离株的基因关联，为制定"避免接触镜接触自来水"的预防策略提供了直接证据。最后，胞内细菌（特别是铜绿假单胞菌）的发现，暗示了复杂感染中可能的协同致病机制，这可能是部分病例治疗反应差的原因。

该研究的创新性在于首次系统描绘了悉尼地区AK的分子流行病学图谱，将环境暴露、基因特征与临床表现有机联系。研究结果对临床实践具有直接指导价值：建议对疑似AK病例尽早进行共聚焦显微镜检查，对PHMB治疗反应不佳者需考虑合并感染可能。公共卫生方面，研究数据支持在接触镜护理指南中强化水源警示，特别是在澳大利亚温暖季节（夏季和春季）的防控宣传。未来研究可扩大样本量，并采用全基因组测序技术追踪感染源，为AK的精准防控提供更强大科学依据。