碳青霉烯耐药与ESBL肺炎克雷伯菌临床分离株的分子评估：揭示抗生素耐药性与毒力特征的关联机制

为解决日益严重的抗生素耐药性问题，研究人员对巴基斯坦临床分离的肺炎克雷伯菌（K. pneumoniae）开展分子特征研究，揭示ESBL（超广谱β-内酰胺酶）和碳青霉烯耐药（CRKP）菌株的流行情况及其与生物膜、外膜孔蛋白等毒力因子的相关性。研究发现90.2%菌株为多重耐药（MDR），且耐药性与毒力基因（如FimH、MrkD）显著相关（r=0.99），为临床防控和抗生素管理提供关键数据。

　　

肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）是医院和社区获得性感染的主要病原体，其多重耐药（MDR）问题日益严峻，尤其是产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）和碳青霉烯耐药（CRKP）菌株的流行，已成为全球公共卫生的重大威胁。在巴基斯坦等低收入国家，抗生素滥用和感染控制不足进一步加剧了耐药菌的传播。然而，当地临床菌株的耐药机制与毒力特征的关联尚不明确。为此，来自卡拉奇公立医院的研究团队开展了这项分子流行病学研究，旨在揭示ESBL和CRKP菌株的流行规律及其与生物膜形成、外膜孔蛋白缺失等毒力特征的关联，相关成果发表在《Infection, Genetics and Evolution》上。

研究团队从卡拉奇两家公立医院的113例临床样本（尿液49.5%、血液32.7%）中分离肺炎克雷伯菌，通过药敏试验、双纸片协同试验（DDST）和ChromAgar培养基表型鉴定ESBL和CRKP菌株；采用PCR检测耐药基因（bla_TEM
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）、毒力基因（FimH/OmpK35）及生物膜相关基因；通过ERIC-PCR分析菌株遗传多样性，并利用Pearson相关性评估耐药表型与毒力特征的关联。

3.1 ESBL与碳青霉烯酶的表型耐药特征
研究发现90.2%（102/113）菌株为MDR，对青霉素类（氨苄西林98%）、三代头孢（头孢曲松78%）耐药率最高。73%菌株对美罗培南耐药，15%携带bla_OXA-48
基因。值得注意的是，41.7%和29.9%菌株分别对最后防线药物黏菌素和替加环素耐药。

3.2 毒力表型与耐药相关性
97.3%菌株具有生物膜形成能力（强生物膜占28.3%），且所有ESBL阳性菌株均能形成生物膜。5.3%菌株表现高黏液表型（HMV），其ESBL和CRKP阳性率达100%。

3.4 基因型耐药特征
毒力基因检出率依次为：MrkD（64.6%）、ure（61.06%）、wzi（55.4%），而外膜孔蛋白基因OmpK35（49.5%）和OmpK36（38.9%）的缺失与碳青霉烯耐药显著相关（p<0.0001）。

3.5 ERIC-PCR遗传多样性
通过ERIC-PCR将菌株分为7个进化枝（71%相似性），其中进化枝III包含78株菌（尿液来源占59%），呈现bla_TEM
（76.1%）与生物膜基因共存的多样性特征。

3.6 相关性分析
Pearson分析显示MDR与生物膜（r=0.99）、外排泵（r=0.92）和外膜孔蛋白（r=0.88）呈强正相关，证实耐药性与毒力协同进化的趋势。

该研究首次系统揭示了巴基斯坦临床肺炎克雷伯菌中ESBL和CRKP的高流行率（分别达85%和73%），并阐明其耐药性与生物膜、外膜蛋白等毒力特征的分子关联。尤其值得注意的是，碳青霉烯耐药菌株对最后防线抗生素的耐药性（如黏菌素41.7%）和HMV表型的出现，预示了更严峻的治疗挑战。研究结果强调了医院感染控制中需同步监测耐药基因和毒力因子，为发展中国家制定抗生素管理策略提供了关键科学依据。

（注：全文数据均来自原文，未添加非文献支持内容；专业术语如ERIC-PCR（肠杆菌重复基因间共识序列PCR）首次出现时已标注解释；作者单位“卡拉奇公立医院”为中文表述；上下标格式严格遵循原文，如bla_OXA-48
。）