靶向PDGFR-β的pPB肽修饰纳米结构脂质载体负载黄芪甲苷IV增强抗肝纤维化治疗的研究

针对肝纤维化治疗中药物靶向性不足和疗效受限的难题，湖州大学附属第一医院团队开发了pPB肽修饰的纳米结构脂质载体（NLCs），通过靶向血小板衍生生长因子受体-β（PDGFR-β）实现黄芪甲苷IV（AST）的精准递送。研究证实pPB/AST NLCs可显著增强活化肝星状细胞（aHSCs）的内吞作用，降低胶原沉积和炎症因子表达，在CCl4 和胆管结扎（BDL）模型中均展现卓越抗纤维化效果。该研究为肝纤维化靶向治疗提供了新策略。

　　

研究背景
肝纤维化是慢性肝病发展的关键病理阶段，其特征是肝星状细胞（HSCs）异常活化导致细胞外基质（ECM）过度沉积。尽管抗纤维化药物如黄芪甲苷IV（AST）具有多重药理活性，但其临床应用受限于低生物利用度和非特异性分布。更棘手的是，传统药物难以精准靶向活化的HSCs（aHSCs），导致疗效不足且全身毒性增加。血小板衍生生长因子受体-β（PDGFR-β）在aHSCs中特异性高表达的特性，为开发靶向递送系统提供了突破口。

研究方法
湖州大学附属第一医院团队构建了pPB肽修饰的纳米结构脂质载体（pPB/AST NLCs），通过动态光散射、透射电镜和高效液相色谱（HPLC）表征其理化性质。采用CCl₄
和胆管结扎（BDL）两种小鼠肝纤维化模型，通过免疫荧光、流式细胞术和ELISA评估靶向效率与治疗效果。关键实验技术包括：HSCs原代分离与鉴定、PDGFR-β介导的内吞机制分析、血清生化检测、Masson染色及羟脯氨酸定量。

研究结果

3.1 pPB/AST NLCs的制备与表征
优化后的pPB/AST NLCs粒径为148.5±27.3 nm，多分散指数0.298，zeta电位-21.9 mV，载药量10.4%。透射电镜显示其呈规则球形，体外释放实验证实pPB修饰不影响AST缓释特性（72小时累积释放70%）。

3.2 pPB肽介导的HSCs靶向活性
免疫荧光显示PDGFR-β在TGF-β1激活的HSCs中表达量较静止态HSCs提高3.2倍。流式检测表明pPB/C6 NLCs在aHSCs的摄取效率是非靶向载体的3.7倍，且可被游离pPB肽竞争性抑制（抑制率68%），证实PDGFR-β依赖性内吞。

3.3 抗纤维化标志物抑制
pPB/AST NLCs使aHSCs中α-SMA和Col1a1表达分别降低62%和55%，显著优于游离AST（p<0.001）。TIM P-1免疫荧光显示其可逆转ECM代谢失衡。

3.4 体内靶向分布
活体成像显示pPB/Dir NLCs在纤维化肝脏的蓄积量是正常肝脏的4.8倍，且滞留时间延长至48小时。流式检测分离的aHSCs证实其靶向效率达89.7%。

3.5 肝纤维化改善效果
在CCl₄
模型中，pPB/AST NLCs组血清ALT/AST水平较模型组下降57%/53%，肝羟脯氨酸含量减少60%。Masson染色显示胶原面积降低72%，α-SMA免疫组化阳性区域减少65%。

3.6 抗炎与抗血管新生
该制剂使TNF-α、IL-6水平分别下降52%和48%，CD31阳性血管密度降低41%，表明其多重调控作用。

结论与意义
该研究创新性地将PDGFR-β靶向肽pPB与NLCs技术结合，解决了AST递送效率低的核心问题。通过双模型验证，pPB/AST NLCs不仅能特异性蓄积于纤维化肝脏，还可通过抑制HSCs活化、调节ECM平衡、阻断炎症-纤维化正反馈环路实现协同治疗。其4.8倍的药时曲线下面积（AUC）提升和17倍半衰期延长，为临床转化提供了药代动力学优势。发表于《International Journal of Biological Macromolecules》的这项研究，为开发基于受体靶向的纳米抗纤维化药物奠定了实验基础。