类风湿关节炎血栓风险新机制：循环膜氨基磷脂通过细胞外囊泡驱动凝血级联反应

本研究针对类风湿关节炎(RA)患者血栓风险升高的机制难题，通过脂质组学技术首次系统分析了循环血细胞及细胞外囊泡(EV)表面氨基磷脂(aPL)分子亚型分布特征，结合体外凝血酶生成实验，揭示EVs携带的磷脂酰丝氨酸(PS)和磷脂酰乙醇胺(PE)是促凝膜的主要来源，为RA血栓防治提供了新靶点。

　　

类风湿关节炎(RA)患者面临显著升高的血栓风险，但其分子机制长期不明。传统观点认为慢性炎症是主要驱动因素，然而作为凝血反应关键平台的细胞膜氨基磷脂(aPL)在RA中的作用从未被系统研究。特别是循环血细胞和细胞外囊泡(EV)表面暴露的磷脂酰丝氨酸(PS)和磷脂酰乙醇胺(PE)分子亚型特征，及其促凝能力的变化，可能隐藏着破解血栓谜题的关键线索。

由英国卡迪夫大学领衔的国际团队在《Journal of Lipid Research》发表的重要研究，首次采用氨基磷脂特异性生物素标记结合LC/MS/MS脂质组学技术，定量分析了RA患者血浆EV、血小板和白细胞(WBC)的内外膜aPL分布特征，并通过体外凝血酶原酶(prothrombinase)实验评估其促凝活性。研究纳入25例RA患者和26例健康对照(HC)，采用纳米颗粒追踪分析(NTA)计数EV，通过Bligh-Dyer法提取脂质，结合生物素化标准品建立定量曲线。

研究结果揭示：

1. D-dimers和TAT复合物升高证实RA存在体内凝血激活
   血浆检测显示52.3% RA患者D-dimer超过临床阈值500 ng/ml，TAT复合物显著升高，证实系统性凝血激活。

2. EV数量增加是促凝膜主要来源
   RA患者血浆EV数量增加50%，直径约150 nm符合微囊泡特征。虽然单位EV促凝活性略低，但总量增加使RA-EV支持更高凝血酶生成，且EV数量与TAT水平显著相关。

3. EV脂质组学揭示aPL分子特征
   LC/MS/MS检测到PS 18:0a_18:1和PS 18:0a_20:4等特异性分子亚型，总aPL水平升高源于EV数量增加。校正数量后，RA-EV外翻PE比例反而降低，可能解释单位促凝活性下降。

4. 血小板数量增加但膜特性未变
   RA患者血小板计数显著升高，但单个血小板aPL外翻和总含量与HC无差异，激活后总PE减少提示磷脂酶水解。

5. 白细胞未显示促凝改变
   WBC数量、aPL分布及促凝能力在两组间无差异，排除其对血栓风险的贡献。

这项研究首次绘制了RA患者循环血细胞和EV的aPL分子图谱，确立EVs是促凝膜的主要载体。其创新性体现在：①建立aPL分子亚型的精准定量方法，突破传统annexin V检测的局限性；②揭示EV数量增加是血栓风险的关键驱动因素；③发现RA血小板存在PE代谢异常。这些发现为开发靶向EV生成或aPL暴露的新型抗凝策略提供了理论依据，对RA患者血栓风险评估和JAK抑制剂相关血栓并发症的防控具有重要临床意义。