基于血清药物化学-色谱指纹谱-网络药理学联用策略的地黄饮子质量标志物系统辨识研究

本研究针对传统中药复方地黄饮子(DHYZ)质量评价体系不完善的难题，创新性地整合血清药物化学、HPLC指纹图谱和网络药理学技术，通过UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS鉴定出血中10种原型成分及17种代谢物，建立16批次样品的HPLC指纹图谱并确定22个共有峰，结合HCA、PCA和OPLS-DA等化学计量学方法筛选出莫诺苷(morroniside)、松果菊苷(echinacoside)和3,6′-二芥子酰基蔗糖等关键质量标志物(Q-markers)，通过网络药理学构建"成分-靶点-通路"网络揭示其通过NF-κB等通路干预阿尔茨海默病(AD)的机制，为经典名方DHYZ的质量标准提升提供科学依据。

　　

在中医药传承创新的时代背景下，经典名方地黄饮子(DHYZ)作为治疗神经退行性疾病的代表性复方，其质量评价却面临"黑箱困境"——15味药材组成的复杂体系使得药效物质基础模糊，传统质控方法难以反映临床有效性。更棘手的是，当前对DHYZ的研究多集中于药理机制，关于其体内代谢规律、整体化学特征与质量关联的研究近乎空白。这种状况严重制约了经典名方的现代化开发和国际化进程。

为破解这一难题，山西中医药大学的研究团队开展了一项跨学科创新研究。通过整合血清药物化学、色谱指纹图谱和网络药理学三大技术体系，首次系统揭示了DHYZ的质量标志物群及其作用机制。这项发表于《Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis》的研究，为经典名方的质量评价提供了可推广的方法学范式。

研究采用UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术分析大鼠血清样本，结合HPLC建立16批次样品的指纹图谱，运用化学计量学(HCA/PCA/OPLS-DA)处理数据，并通过网络药理学构建"成分-靶点-疾病"网络。实验选用SPF级SD大鼠制备含药血清，药材采购自安徽、河北等道地产区并经生药学鉴定。

在血清药物化学分析部分，研究鉴定出88种DHYZ提取物成分，包括环烯醚萜苷、苯乙醇苷等7类物质。特别重要的是发现10种血中移行成分（如肉桂醛、松果菊苷）和17种代谢物（如咖啡酸、对香豆酸），这些成分通过还原反应、羟基化等代谢途径转化。色谱指纹图谱研究建立了16批次样品的HPLC特征图谱，确定22个共有峰（相似度>0.9），并定量分析了8种成分包括莫诺苷、松果菊苷等。化学计量学分析显示，OPLS-DA模型稳定可靠（R²
Y=0.991，Q²
=0.911），VIP值筛选出莫诺苷（峰4）、松果菊苷（峰9）等4个关键差异成分。

网络药理学研究获得27个活性成分的791个作用靶点，与阿尔茨海默病的1614个靶点取交集得到200个共同靶点。PPI网络分析显示GAPDH、TNF、ALB等为核心靶点，KEGG富集分析揭示这些成分通过癌症通路、脂质与动脉粥样硬化、AGE-RAGE信号通路等发挥作用。特别值得注意的是，莫诺苷可通过降低MMP2、MMP9和caspase-3减少细胞凋亡，松果菊苷则通过调节IL-2、STAT3抑制炎症反应，这些发现为DHYZ治疗AD提供了分子层面的解释。

研究最终确定莫诺苷、松果菊苷和3,6′-二芥子酰基蔗糖作为DHYZ的质量标志物，这三类成分兼具"可测性"（色谱指纹图谱可定量）、"溯源性"（血清药物化学证实体内暴露）和"有效性"（网络药理学验证作用机制）。该研究创新性地构建了"体外成分-体内代谢-质控指标-作用机制"的全链条研究模式，不仅解决了DHYZ质量标准提升的技术瓶颈，更为经典名方的质量研究提供了可复制的方法学框架。从更广阔的视角看，这种多学科交叉整合策略，为破解中药复方"成分复杂-效应多元"的质控难题开辟了新路径，对推动中医药现代化具有示范意义。