TSPAN15通过BTRC介导的PDCD4泛素化降解促进自噬依赖性EMT及肝癌转移的机制研究

本研究针对肝癌（HCC）高转移性与不良预后的临床难题，揭示了Tetraspanin 15（TSPAN15）通过β-转导重复序列蛋白（BTRC）促进抑癌基因PDCD4的泛素化降解，激活自噬并驱动上皮-间质转化（EMT）的分子机制。研究人员结合生物信息学分析、裸鼠移植瘤模型及细胞实验，证实TSPAN15沉默可显著抑制HCC自噬、EMT及转移，为靶向TSPAN15/BTRC/PDCD4通路的新型抗HCC策略提供理论依据。

　　

肝癌是全球癌症相关死亡的主要原因之一，五年生存率不足20%，其高转移性和治疗抵抗性仍是临床重大挑战。近年来，自噬（Autophagy）与上皮-间质转化（EMT）的关联成为研究热点——自噬为肿瘤细胞提供能量支持EMT进程，而EMT驱动的细胞迁移和侵袭又加速了肝癌转移。然而，调控这一恶性循环的关键分子机制尚不明确。南通大学附属医院的研究团队在《Molecular Immunology》发表论文，首次揭示四跨膜蛋白TSPAN15通过泛素-蛋白酶体系统调控PDCD4降解，进而激活自噬-EMT轴促进肝癌转移的全新机制。

研究采用多组学技术联用的策略：通过TIMER、GEPIA等数据库筛选TSPAN15作为关键靶点；利用25例临床HCC样本验证其表达特征；结合重组质粒转染、Transwell迁移侵袭实验、自噬流检测（LC3I/II转换分析）及裸鼠体内实验，系统阐明TSPAN15的功能；采用免疫共沉淀（Co-IP）揭示TSPAN15-BTRC-PDCD4的相互作用网络。

3.1 TSPAN15高表达预示HCC不良预后
生物信息学分析显示TSPAN15在HCC组织中的mRNA和蛋白水平均显著上调（TIMER数据库：p<0.001）。TCGA-LIHC队列证实，TSPAN15^high
患者总生存期更短（HR=1.82，p=0.003），多因素分析确立其为独立风险因子。免疫组化显示TSPAN15主要定位于HCC细胞质，与临床分期正相关（p<0.05）。

3.2 TSPAN15沉默抑制自噬依赖性EMT
敲低TSPAN15的HCC细胞中，自噬标志物Beclin-1和LC3II/LC3I比值下降60%（Western blot），同时EMT关键转录因子Snail和Vimentin表达降低，而上皮标志物E-cadherin恢复2.3倍。Transwell实验显示侵袭细胞数减少75%（p<0.001），裸鼠肺转移结节数下降80%。

3.3 BTRC介导PDCD4泛素化降解
Co-IP证实TSPAN15与E3连接酶BTRC直接结合，促进PDCD4的K48位多聚泛素化（Ub^K48
）。蛋白酶体抑制剂MG132处理可逆转PDCD4降解，而PDCD4过表达能抵消TSPAN15诱导的自噬（ATG5 mRNA结合减少40%）和EMT（Snail下调50%）。

讨论与意义
该研究首次阐明TSPAN15通过"E3连接酶适配器"的新功能，桥接BTRC与PDCD4形成降解复合体。PDCD4的缺失解除对ATG5翻译的抑制，触发自噬-EMT正反馈循环。临床转化方面，针对TSPAN15/BTRC的小分子抑制剂或可阻断该通路，而PDCD4激动剂（如二氢青蒿素）可能成为联合治疗选择。作者团队进一步提出"自噬依赖性转移"的HCC分子分型框架，为个体化治疗提供新思路。