AAV介导的神经肽Y及Y2受体海马区基因疗法在啮齿类与非人灵长类癫痫模型中的抗痫机制研究

本研究针对30%耐药性癫痫患者临床需求，开发了AAV载体SPK100.NPY-Y2R介导的基因疗法。通过啮齿类快速点燃模型和Synapsin三重敲除小鼠证实，海马过表达神经肽Y(NPY)及其Y2受体(Y2R)可显著抑制癫痫发作；并在狒狒模型中实现磁共振引导下海马精准递送，为颞叶癫痫治疗提供新策略。

　　

全球约5000万癫痫患者中，30%对现有抗癫痫药物耐药，颞叶癫痫尤其难以控制。海马区异常放电是癫痫发作的关键病理基础，而神经肽Y(NPY)通过激活Y₂
受体(Y2R)可抑制兴奋性突触传递。既往研究虽在啮齿类模型中证实NPY/Y2R的抗痫作用，但缺乏临床转化所需的非人灵长类验证和精准递送方案。

为解决这一难题，研究人员开发了新型AAV载体SPK100.NPY-Y2R。通过原代大鼠皮层神经元培养和小鼠海马离体切片实验，证实该载体可抑制自发放电和诱发活动。在快速点燃大鼠模型中，海马注射显著延缓癫痫进展并缩短发作时长。同步在Synapsin三重敲除（遗传性癫痫模型）小鼠中验证了其对自发性癫痫的抑制作用。最具突破性的是，研究首次在狒狒(Papio hamadryas)海马实现磁共振引导下的对流增强给药，证实了该疗法在灵长类的安全性和靶向性。

关键技术包括：1）AAV载体工程化设计；2）离体电生理记录；3）啮齿类快速点燃与遗传模型构建；4）非人灵长类磁共振引导对流增强给药系统。

主要结果：

1. 体外验证：SPK100.NPY-Y2R转染的神经元自发放电频率降低40%，小鼠海马切片场电位振幅下降60%。
2. 啮齿类模型：快速点燃大鼠发作持续时间缩短55%，Synapsin敲除小鼠自发性发作减少70%。
3. 非人灵长类转化：狒狒海马区AAV覆盖率达80%，且无免疫反应或神经毒性。

该研究首次实现NPY-Y2R疗法从啮齿类到灵长类的全链条验证，其创新性体现在：1）双基因协同递送策略；2）临床级给药路径验证；3）为耐药性颞叶癫痫提供精准治疗选择。发表于《Molecular Therapy》的这项成果，标志着癫痫基因治疗向临床转化迈出关键一步。