双重阻断TNFR2与CD47重塑结直肠癌免疫微环境并增强抗肿瘤效应

【编辑推荐】结直肠癌(CRC)免疫治疗面临CD47单药疗效有限及免疫抑制微环境难题。南京大学团队创新性提出CD47/TNFR2双重阻断策略，开发新型双抗融合蛋白ATA47及溶瘤腺病毒载体AdV-ATA47，显著降低Tregs（调节性T细胞）和M-MDSCs（单核髓系抑制细胞），激活CD8+ T细胞与巨噬功能，为CRC联合治疗提供新方案。

　　

结直肠癌长期位居全球癌症死亡前列，晚期患者治疗选择有限。尽管免疫检查点抑制剂革新了肿瘤治疗格局，但结直肠癌对CD47单抗的反应率不尽如人意——这个被誉为"别吃我"信号的关键分子，虽能通过阻断CD47-Sirpα（信号调节蛋白α）相互作用促进巨噬细胞吞噬肿瘤，却因广泛表达于红细胞导致血液毒性，且单独使用难以克服肿瘤微环境中Tregs和MDSCs（髓系来源抑制细胞）构筑的免疫抑制屏障。

南京大学研究团队另辟蹊径，将目光投向肿瘤坏死因子受体2（TNFR2）。这个在Tregs和MDSCs上高表达的分子，如同免疫抑制的"加速器"，能增强这些细胞的存活与功能。研究者设想：若同时切断CD47的"别吃我"信号和TNFR2的"促抑制"信号，能否实现协同破防？

研究团队通过构建CT26和MC38小鼠结直肠癌模型，发现CD47单抗仅能轻微抑制肿瘤生长，而联合TNFR2阻断后，肿瘤控制率和生存期显著提升。机制研究表明，这种双重打击策略使肿瘤微环境发生"去免疫抑制化"重塑：Tregs和M-MDSCs比例下降，CD8⁺
T细胞活化标志物CD44⁺
CD62L^-
亚群扩增，巨噬细胞吞噬功能增强。

为提升治疗精准度，团队进一步开发了双特异性抗体融合蛋白ATA47，其效果媲美联合用药。更巧妙的是，将ATA47基因装载至溶瘤腺病毒（AdV-ATA47）后，这种"智能导弹"能在肿瘤局部释放免疫调节蛋白，在KPC胰腺癌模型和患者来源异种移植（PDX）模型中均显示强劲抗肿瘤活性，且系统毒性显著降低。

关键技术包括：1）建立CT26/MC38 murine CRC模型及PDX模型；2）流式细胞术分析免疫细胞亚群；3）双特异性抗体（bispecific antibody）工程技术；4）溶瘤腺病毒（oncolytic adenovirus）载体构建；5）体外吞噬实验评估巨噬细胞功能。

【双重阻断协同增效】
在CT26模型中，CD47单抗仅使肿瘤体积减少18%，而联合TNFR2阻断后抑制率达67%。RNA测序显示联合组干扰素-γ通路显著激活，免疫抑制相关基因下调。

【双抗设计突破局限】
ATA47采用IgG2a Fc增强抗体依赖性细胞毒性（ADCC），体外实验证实其可同时阻断CD47-Sirpα和TNFα-TNFR2相互作用，且避免红细胞凝集副作用。

【溶瘤病毒精准递送】
AdV-ATA47在肿瘤组织的病毒拷贝数超正常组织100倍，局部表达的ATA47使CD8⁺
T细胞浸润增加3倍，与PD-1抑制剂联用产生完全缓解案例。

该研究首次揭示CD47/TNFR2双重靶向在CRC治疗中的协同价值，创新性融合溶瘤病毒与双抗技术，为克服肿瘤免疫抑制微环境提供新范式。特别值得注意的是，AdV-ATA47的局部表达特性既解决了CD47靶向治疗的全身毒性难题，又通过病毒诱导的免疫原性死亡进一步增强抗肿瘤免疫，这种"双管齐下"策略对PD-1耐药肿瘤具有重要转化意义。研究结果发表于《Molecular Therapy》，为CRC联合免疫治疗临床开发奠定基础。