AAV载体经上橄榄复合体轴突运输实现成年啮齿类动物耳蜗高效转导

为解决成年哺乳动物螺旋神经节神经元(SGNs)基因转导效率低下的难题，研究人员创新性采用AAV载体经上橄榄复合体轴突运输路径，系统评估了AAV6/9/Anc80/PhP.B等血清型在耳蜗不同区域（顶/中/底转）的转导特性，成功实现SGNs与毛细胞(HCs)的差异化高效转导，为感音神经性聋的基因治疗提供了新策略。

　　

在感音神经性听力损失的治疗领域，毛细胞(HCs)的基因治疗已取得显著进展，但作为听觉信号传导关键环节的螺旋神经节神经元(SGNs)却因技术瓶颈长期难以突破。成年动物耳蜗局部注射腺相关病毒(AAV)载体时，SGNs的转导效率在出生后P1-P3天即出现断崖式下降，这一现象严重制约了听觉修复治疗的临床转化。面对这一挑战，研究团队另辟蹊径，基于其既往在脑科学领域利用轴突运输实现远端脑区转导的技术积累，创新性地将上橄榄复合体——这一听觉通路中与SGNs存在突触连接的中继核团——作为AAV递送的新靶点。

该研究发表于《Molecular Therapy》，通过立体定位注射技术将表达绿色荧光蛋白(GFP)的AAV6、AAV9、AAV-Anc80和AAV-PhP.B载体精准递送至成年大鼠上橄榄复合体，借助神经元固有的轴突运输机制，系统评估了不同血清型载体在耳蜗三维空间（顶转、中转、底转）的转导特征。关键技术包括：成年大鼠脑立体定位注射、免疫荧光共聚焦成像、耳蜗基底膜铺片技术，以及来自人尸检组织的SGN培养模型验证。

研究结果揭示：

1. 全耳蜗转导的可行性：所有测试血清型均能通过轴突运输途径实现耳蜗转导，证实上橄榄复合体注射策略的有效性。
2. 血清型依赖性转导模式：AAV6和AAV9表现出对SGNs的强偏好性，而AAV-Anc80则同时靶向SGNs和HCs，AAV-PhP.B显示出独特的区域特异性——在耳蜗顶转优先转导HCs，底转则倾向SGNs。
3. 空间异质性：转导效率沿耳蜗螺旋呈现梯度变化，AAV9在底转SGNs的转导率高达72±5%，显著优于其他区域。

这项研究开创性地证明：通过听觉通路中的轴突运输网络，可实现成年哺乳动物耳蜗神经元的非侵入性高效转导。其科学价值在于：①突破传统耳蜗局部注射的年龄限制，为成年患者SGNs基因编辑提供可能；②揭示AAV血清型在耳蜗三维空间的转导规律，为精准治疗方案设计提供依据；③建立经中枢神经系统递送治疗基因的新范式，对帕金森病等神经退行性疾病的靶向治疗具有启示意义。正如研究者强调，该技术路径可有效规避耳蜗内注射导致的组织损伤风险，为临床转化铺平道路。