远端气道上皮祖细胞通过介导TGF-β释放驱动黏膜BCG疫苗接种后肺CD8+ TRM 细胞诱导的机制研究

为解决结核疫苗BCG无法诱导肺黏膜免疫记忆的难题，研究人员通过黏膜接种重组BCG::RD1菌株，揭示远端气道上皮祖细胞通过整合素介导的TGF-β激活途径驱动CD8+ TRM 分化，显著增强抗结核保护力，为新型黏膜疫苗设计提供关键理论依据。

　　

结核病（TB）仍是全球十大死因之一，现有卡介苗（BCG）因无法诱导肺组织驻留记忆T细胞（T_RM
）导致保护力有限。新冠疫情更凸显非黏膜疫苗对呼吸道感染的防御缺陷。澳大利亚詹姆斯库克大学Judith A. Blake团队在《Mucosal Immunology》发表研究，首次揭示黏膜接种重组BCG::RD1通过远端气道上皮祖细胞-Sox2⁺
/Krt8⁺
过渡态细胞-整合素αVβ6-TGF-β轴，驱动CD8⁺
T_RM
分化的分子机制。

研究采用C57BL/6小鼠模型，结合谱系追踪（Sox2^CreERT2
/Ai14
）、Itgβ6
基因敲除、多色流式细胞术和显微成像技术。通过比较不同剂量/毒力BCG（SSI低/高剂量、RD1重组株）的黏膜接种效果，动态监测肺泡上皮细胞（AEC1/AEC2）损伤、上皮祖细胞迁移及CD8⁺
T_RM
亚群（CD103⁺
CD69⁺
CD49a⁺
）变化，并评估其对结核分枝杆菌（Mtb
）攻击的保护效力。

【BCG毒力与剂量影响肺泡上皮细胞丢失】
高毒力BCG::RD1引发显著AEC1坏死（21天达峰），伴随广泛肺泡结构破坏，其损伤程度显著高于传统BCG SSI（P<0.01）。组织病理学显示，RD1组肺泡区20%被Krt8⁺
过渡态祖细胞（TP）占据，较SSI低剂量组（5%）高4倍，证实毒力决定上皮修复规模。

【上皮祖细胞亚群响应模式】
仅Sox2⁺
远端气道和pSPC⁺
肺泡祖细胞参与修复，Krt5⁺
远端气道干细胞（DASC）未被激活。RD1组Sox2⁺
细胞早期（7天）快速迁移至损伤区，通过"反向定位"转化为Krt8⁺
TP，最终分化为AEC1。谱系追踪显示RD1组再生肺泡中Sox2⁺
来源AEC1数量达SSI组的6倍（P<0.01）。

【CD8⁺
T_RM
诱导的时空特征】
RD1组CD8⁺
T_RM
峰值（28天）占肺CD8⁺
T细胞的45%，显著高于SSI组（25%）。关键发现是CD103⁺
亚群与Krt8⁺
TP空间共定位，且 mediastinal淋巴结（mLN）持续存在T_RM
表型细胞（120天），提示循环记忆库形成。

【TGF-β激活的核心机制】
RD1组肺泡间质活性TGF-β面积达8%（21天），而Itgβ6
KO小鼠仅1%（P<0.01）。基因敲除实验证实：αVβ6缺失导致CD103⁺
T_RM
减少50%，但意外增强CD8⁺
T_EM
效应功能，使脾脏Mtb
载量降低10倍（P<0.01）。

讨论部分指出，该研究首次建立"上皮损伤-祖细胞迁移-整合素/TGF-β激活-T_RM
诱导"的级联反应模型。虽然CD8⁺
T_RM
在肺组织持久性有限（4个月衰减），但mLN滞留的T_RM
表型细胞可能构成二次防御储备。研究为优化黏膜疫苗提供三大启示：①RD1毒力因子可增强上皮-免疫互作；②需平衡TGF-β水平以避免纤维化风险；③Krt8⁺
TP阶段是干预关键节点。这些发现不仅推动结核疫苗设计，也为呼吸道病毒感染后的组织修复-免疫记忆耦合机制研究提供范式。