中国喀斯特地区蜘蛛病原真菌新发现：四个新种及一个新属的分类与系统发育研究

本研究针对中国西南喀斯特地区蜘蛛病原真菌多样性未充分探索的问题，研究人员通过形态学比较、多基因系统发育分析（ITS/LSU/RPB2/tef-1α）和PHI检测，在肉座菌目（Hypocreales）中鉴定了Clavicipitaceae科的Chlorocillium guizhouense sp. nov.、C. vallense sp. nov.和Cordycipitaceae科的Gamszarella sinensis sp. nov.、G. vallensis sp. nov.四个新种，并建立新属Neogamszarella以容纳Gamszarella antillana。该研究揭示了喀斯特地区蜘蛛病原真菌的独特多样性，为虫生真菌资源开发提供重要依据。

　　

中国西南喀斯特地区是全球36个生物多样性热点之一，其独特的生态系统孕育了大量未被充分研究的真菌资源。蜘蛛病原真菌（araneogenous fungi）作为一类重要的生态功能类群，在生物防治和医药开发中具有潜在价值。然而，目前对喀斯特地区这类真菌的多样性认知仍存在显著空白。针对这一问题，贵州大学真菌资源研究所的研究团队通过系统的野外调查和实验室分析，在《MycoKeys》发表了突破性研究成果，揭示了该地区蜘蛛病原真菌的隐藏多样性。

研究团队采用多学科交叉方法：首先在贵州黔东南苗族侗族自治州、黔南布依族苗族自治州等地采集蜘蛛寄生标本，通过表面消毒和PDA培养基分离纯化菌株；随后结合形态学特征观察（显微测量分生孢子梗、产孢细胞等结构）和分子系统学分析，对ITS、LSU、RPB2和tef-1α多基因片段进行PCR扩增和测序；利用MAFFT和MEGA6进行序列比对，通过IQ-TREE和MrBayes构建最大似然法（ML）和贝叶斯推断（BI）系统发育树；最后应用基因一致性物种识别（GCPSR）模型中的配对同塑性指数（PHI）检验进行物种界定。

Phylogenetic analyses
基于ITS+LSU+tef-1α三基因数据集的分析显示，菌株DL10171/DL10172和DY09021/DY09022分别形成独立分支，与已知Chlorocillium物种明显分化（ML支持率93%）。在Cordycipitaceae的四基因分析中，WD04081/WD04082和WD04101/WD04102菌株与Gamszarella antillana构成高支持度分支（100% ML/1 PP）。

Genealogical Concordance Phylogenetic Species Recognition analysis
PHI检验值（Φ_w
=1.0）证实新分类单元与近缘种存在显著遗传分化。分裂图显示Chlorocillium新种与C. araneogenum、C. griseum等物种间无基因重组信号，支持其独立物种地位。

Taxonomy
形态学比较发现：

1. Chlorocillium guizhouense以分生孢子较小（2.6–3.8 × 1.1–1.6 μm）区别于C. araneogenum（3.4–5.8 × 1.4–1.8 μm）；
2. C. vallense产孢细胞更短（9.2–17.1 × 0.8–1.2 μm）且生长更快；
3. Gamszarella sinensis产孢细胞具齿状突起（7.0–12.0 × 1.0–1.5 μm），而G. antillana无此特征；
4. 新属Neogamszarella因G. antillana产生两类分生孢子且含八面体晶体的独特特征而建立。

这项研究首次系统报道了喀斯特地区蜘蛛病原真菌在Clavicipitaceae和Cordycipitaceae科的新分类单元，通过整合形态-分子证据确立了"多维度物种界定"方法在虫生真菌分类中的应用范式。发现的4个新种及新属不仅丰富了全球真菌多样性记录，更凸显了喀斯特地区作为特殊生态系统中虫生真菌资源库的战略价值，为后续开展生物防治剂研发和宿主-病原协同进化研究提供了关键材料基础。研究结果也提示，中国西南地区可能蕴藏着更多未被描述的虫生真菌资源，亟待通过跨学科方法进行深度挖掘。