金纳米颗粒偶联卵清蛋白通过口服耐受间接效应促进小鼠耳部创面修复的机制研究

本研究针对传统铝佐剂(Al(OH)3 )在伤口愈合应用中存在的局限性，创新性地采用金纳米颗粒(AuNPs)偶联卵清蛋白(OVA)构建新型佐剂系统。通过建立小鼠口服耐受模型，发现皮下注射AuNPs@OVA不仅能增强非耐受小鼠的IgG1/IgG2a抗体应答，还可通过调控TBET+ 细胞比例显著改善耐受小鼠耳部创面的组织重塑，其效果优于传统铝佐剂，为纳米材料在免疫调节与创伤修复领域的应用提供了新思路。

　　

在免疫治疗领域，口服耐受现象一直备受关注——当机体通过消化道接触某种蛋白质后，后续注射相同蛋白时会产生特异性免疫抑制。这种现象主要由CD4⁺
T细胞亚群（如分泌TGF-β/IL-10的TH3细胞、产生IL-10的Tr1细胞以及CD4⁺
CD25⁺
Treg细胞）介导。传统铝佐剂Al(OH)₃
虽能增强口服耐受的间接效应（即抑制对无关抗原的免疫应答并促进伤口愈合），但其存在诱发注射部位炎症、难以诱导Th1/Th17免疫应答等缺陷。针对这一瓶颈，来自巴西米纳斯吉拉斯联邦大学的研究团队创新性地将金纳米颗粒(AuNPs)与卵清蛋白(OVA)结合，系统探究了这种纳米佐剂在口服耐受模型中对耳部创面修复的调控作用，相关成果发表于《Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine》。

研究采用谷胱甘肽-硼氢化钠还原法合成直径约6.84 nm的球形AuNPs，通过透射电镜(TEM)和Zeta电位验证其与OVA的偶联效果。建立雄性瑞士小鼠口服OVA耐受模型后，在尾基部皮下注射AuNPs@OVA，并于20天后加强免疫，同时在首次注射时制造耳部创面。通过检测抗体水平、流式细胞术分析淋巴细胞亚群以及组织学评估等手段，系统比较了纳米佐剂与传统铝佐剂的效应差异。

金纳米颗粒表征
TEM显示合成的AuNPs呈标准球形，紫外可见光谱在520 nm处出现特征吸收峰。与OVA偶联后表面电位从-34.0 mV升至-22.4 mV，证实蛋白成功修饰。这种尺寸均一的纳米结构为后续免疫调控研究提供了理想载体。

免疫应答分析
在非耐受小鼠中，AuNPs@OVA显著提升抗OVA的IgG1、IgG2a及总抗体水平，同时增加注射部位白细胞浸润。而在OVA耐受小鼠中，该纳米佐剂选择性地提高尾淋巴结TBET⁺
细胞比例（脾脏无此效应），提示其对局部免疫微环境的精准调控能力。

创面修复评估
组织学结果显示，AuNPs@OVA处理的耐受小鼠耳部创面呈现更优的组织重构：胶原纤维排列更有序，炎症浸润减少，瘢痕形成减轻。这种促修复效果显著优于传统铝佐剂组，证实纳米材料可更高效地利用口服耐受的间接效应。

该研究首次证实AuNPs@OVA兼具双重优势：既能作为高效佐剂增强特异性免疫应答，又可通过调控T细胞亚群促进创伤修复。其机制可能涉及：纳米载体增强抗原提呈效率；负电性表面调节免疫细胞活化；精准调控局部淋巴组织免疫平衡。相比传统铝盐，金纳米佐剂具有生物相容性好、代谢快、剂量需求低等特点，为开发新型创伤修复制剂提供了重要参考。特别值得注意的是，该发现为纳米材料在免疫耐受相关疾病（如自身免疫病、移植排斥）中的应用开辟了新途径，未来或可通过"口服耐受+纳米佐剂"的组合策略实现更精准的免疫干预。