Linarin通过调控NF-κB p-p65/MMP-9/Bax/Caspase 3/7通路抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞生存与转移的机制研究

针对三阴性乳腺癌(TNBC)缺乏有效靶向治疗的难题，研究人员通过2D/3D细胞模型探究了天然产物linarin的抗癌机制。结果表明，linarin通过下调NF-κB p-p65/MMP-9、上调Bax、激活Caspase3/7显著抑制MDA-MB-231细胞存活(2D IC50 120.8μM，3D IC50 1949μM)和迁移(p<0.0001)，为TNBC治疗提供了新型候选药物。

　　

三阴性乳腺癌(TNBC)作为乳腺癌中最凶险的亚型，因其雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(HER2)的缺失，导致传统内分泌治疗和靶向药物失效。尽管仅占乳腺癌病例的15-20%，却造成了不成比例的高死亡率。更棘手的是，传统二维(2D)培养模型难以模拟肿瘤微环境的复杂性，使得药物筛选结果与临床效果存在显著差距。这些瓶颈问题促使科学家们寻求更精准的研究模型和新型治疗策略。

发表于《Natural Product Research》的研究聚焦天然黄酮类化合物linarin的抗TNBC潜力。研究人员采用2D单层培养与3D球体培养相结合的策略，通过CCK-8法检测细胞活力、划痕实验评估迁移能力、Western blot分析关键蛋白表达。特别值得注意的是，3D培养系统能更好地模拟肿瘤组织结构特征，为药物效应评估提供了更接近体内的实验条件。

Linarin对细胞活力的影响
实验数据显示linarin呈浓度依赖性抑制MDA-MB-231细胞增殖，2D和3D培养的IC₅₀
值分别为120.8μM和1949μM(p<0.001)。值得注意的是，3D培养所需药物浓度显著增高，这可能与球体结构造成的药物渗透屏障有关，也提示临床应用中需考虑肿瘤组织结构对药效的影响。

迁移能力抑制
划痕实验证实linarin处理组细胞迁移率显著降低(p<0.0001)，这与MMP-9表达下调直接相关。作为降解细胞外基质的关键酶，MMP-9的抑制意味着linarin可能阻断肿瘤侵袭转移的早期步骤。

凋亡机制激活
Western blot结果显示Bax蛋白表达上调1.8倍，同时Caspase3/7活性增强4.3倍(p<0.0001)。Bax作为促凋亡蛋白，其过表达可诱导线粒体途径凋亡，而Caspase3/7则是凋亡执行的效应分子，这一系列变化证实linarin通过内源性凋亡途径发挥作用。

NF-κB通路调控
p-p65蛋白水平下降60%的结果尤为关键。NF-κB作为炎症和生存相关信号的核心转录因子，其磷酸化形式(p-p65)的抑制将直接影响肿瘤细胞的抗凋亡能力，这也为linarin的多靶点作用提供了分子解释。

3D球体形态学改变
光学显微镜观察到linarin处理组球体出现结构松散现象，这种"解聚效应"可能与细胞间连接蛋白的破坏有关，暗示药物可能干扰肿瘤细胞间的通讯机制。

该研究系统论证了linarin通过协同调控NF-κB/MMP-9促生存通路与Bax/Caspase凋亡通路发挥抗TNBC作用。特别有价值的是，研究采用3D培养模型获得的IC₅₀
数据更具临床参考价值，为天然产物抗肿瘤研究提供了方法学示范。虽然linarin在3D模型中所需浓度较高，但其多靶点作用特征和低毒性优势，使其成为TNBC联合治疗方案的潜在候选。未来研究可进一步优化给药策略，如开发纳米递送系统以提高对实体瘤的穿透性。这些发现不仅为TNBC治疗提供了新思路，也为其他实体瘤的药物研发提供了重要参考。