Fibulin-5通过抑制TGF-β1依赖性神经元凋亡缓解小鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤的机制研究

本研究针对蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤(EBI)的病理机制，探究了细胞外基质蛋白Fibulin-5(FBLN5)的神经保护作用。通过构建小鼠SAH模型并给予不同剂量重组FBLN5(rFBLN5)，发现含RGD基序的长型FBLN5(LrFBLN5)可剂量依赖性改善神经功能，抑制caspase-3依赖性神经元凋亡，其机制与下调TGF-β1表达相关。该研究为SAH后神经保护提供了新靶点。

　　

蛛网膜下腔出血(SAH)是一种致死率高达35%的危急重症，其中早期脑损伤(EBI)是决定预后的关键因素。尽管临床研究发现血浆Fibulin-5(FBLN5)水平与SAH患者不良预后相关，但这一基质细胞蛋白在SAH病理过程中的具体作用机制尚不明确。FBLN5作为细胞外基质的重要组分，含有6个钙结合表皮生长因子样基序和精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)基序，既往研究提示其可能通过调控转化生长因子-β(TGF-β)信号通路参与细胞凋亡过程。然而，FBLN5是否通过特定功能域影响SAH后神经元凋亡，成为亟待解决的科学问题。

为阐明这一机制，研究人员构建了小鼠血管穿刺SAH模型，通过脑室注射给予不同剂量短型(SrFBLN5)和长型重组FBLN5(LrFBLN5)。采用改良Garcia神经行为评分评估功能缺损，脑组织含水量测定评估脑水肿，TUNEL染色和cleaved caspase-3(CC3)免疫组化检测神经元凋亡，Western blot分析TGF-β1、Smad 2/3、MAPKs等信号分子表达。

研究结果显示，LrFBLN5可剂量依赖性改善SAH后神经功能缺损，且该保护作用与其RGD基序相关。在机制层面，LrFBLN5显著降低SAH诱导的TUNEL阳性神经元比例和CC3表达，证实其抗凋亡效应。Western blot分析发现SAH后脑组织TGF-β1表达显著升高，而LrFBLN5处理可抑制这一变化，但Smad 2/3和MAPKs信号通路未见明显改变。值得注意的是，另一种基质细胞蛋白tenascin-C(TNC)的表达未受SAH或FBLN5干预影响。

这些发现首次揭示FBLN5在SAH急性期的神经保护作用：含RGD基序的LrFBLN5通过下调TGF-β1表达，抑制caspase-3依赖性神经元凋亡途径，从而改善SAH后EBI。该研究不仅为理解基质细胞蛋白在脑血管疾病中的作用提供了新视角，更提示FBLN5可能成为SAH后神经保护治疗的潜在靶点。特别值得注意的是，研究观察到FBLN5对TGF-β1的调控不依赖经典Smad通路，这为探索非经典TGF-β信号在脑损伤中的作用开辟了新方向。

尽管研究存在取样时间点单一、剂量效应关系不完全明确等局限，但其创新性在于：首次在SAH模型中证实FBLN5的神经保护作用；阐明RGD基序是其功能关键结构域；揭示FBLN5-TGF-β1-神经元凋亡轴在EBI中的重要性。这些发现为临床SAH治疗策略开发提供了重要理论基础，未来研究可进一步探索FBLN5与其他基质蛋白的相互作用及其在脑血管疾病中的动态表达规律。