奥瑞珠单抗通过调控let-7a-5p及其靶基因表达影响多发性硬化症神经炎症的机制研究

本研究针对多发性硬化症(MS)治疗中B细胞靶向药物奥瑞珠单抗(Ocrelizumab)的分子调控机制展开探索。研究人员通过对比10例MS患者治疗前后血液样本中miRNAs和炎症相关基因的表达谱，发现奥瑞珠单抗可显著上调let-7a-5p并下调TNF-α、IL-6、NEFL和SLC16A10的表达。生物信息学分析揭示let-7a-5p与这些基因存在直接/间接调控关系，提示该药物可能通过miRNA介导的次级机制发挥神经保护作用，为优化MS治疗方案提供了新视角。

　　

多发性硬化症(MS)作为一种累及中枢神经系统的自身免疫性疾病，全球约280万患者深受其害。尽管靶向CD20⁺
B细胞的奥瑞珠单抗(Ocrelizumab)已展现出显著的临床疗效，但其分子层面的作用机制仍存在大量未知。特别是在microRNA(miRNA)调控网络层面，该药物如何影响神经炎症和神经退行性进程，成为亟待解答的科学问题。

为解决这一关键问题，坎帕尼亚大学的研究团队开展了一项创新性研究。他们选取10例接受奥瑞珠单抗治疗的MS患者，通过采集治疗前后外周血样本，采用RT-qPCR技术系统分析了let-7a-5p、miR-146a-5p等miRNAs与IL-6、TNF-α等炎症因子的表达变化。研究创新性地结合生物信息学工具（包括RNAInter、DAVID和Cytoscape等），构建了药物- miRNA-基因的调控网络。

关键技术方法包括：1) 从10例MS患者治疗前后采集配对PBMC样本；2) 使用miRCURY LNA miRNA Focus PCR芯片筛选差异miRNAs；3) SYBR Green法验证关键miRNA/mRNA表达；4) Pearson相关分析揭示let-7a-5p与靶基因的调控关系；5) 通过RNAInter数据库预测分子相互作用；6) DAVID和g:Profiler进行通路富集分析。

研究结果部分：
3.1 患者队列特征：研究纳入5女7男患者(平均年龄41岁)，包含PPMS、SPMS和RRMS三种亚型，EDSS评分基线2.3分，治疗1年后升至3.4分。

3.2 差异表达分析：奥瑞珠单抗治疗后，let-7a-5p表达显著上调2.4倍(p=0.01)，而TNF-α、IL-6、NEFL和SLC16A10分别下调81.8%、99.2%、53.9%和99.1%(p<0.05)。Pearson分析显示let-7a-5p与这4个基因呈强负相关(r=-0.84至-0.96)。

3.3 调控网络分析：数据库验证显示let-7a-5p可直接靶向TNF-α、IL-6和SLC16A10的3'UTR，与NEFL通过APP等共享蛋白间接互作。通路分析发现这些分子共同参与病毒反应、神经胶质细胞激活等MS相关进程。

讨论部分指出，这是首次揭示奥瑞珠单抗可能通过let-7a-5p介导的"miRNA-炎症因子轴"发挥治疗作用。let-7a-5p的上调不仅可能抑制促炎因子(TNF-α/IL-6)，还可能通过下调NEFL减轻轴突损伤，而SLC16A10的抑制暗示药物对T细胞代谢的潜在影响。特别值得注意的是，这些效应独立于药物已知的B细胞耗竭机制，为理解其临床疗效提供了新维度。

该研究发表在《Non-coding RNA Research》的发现具有重要转化价值：一方面，let-7a-5p及其靶基因可能成为监测奥瑞珠单抗疗效的新型生物标志物；另一方面，揭示的miRNA调控网络为开发联合治疗策略提供了理论依据。作者Bruna De Felice等强调，未来需通过功能实验验证let-7a-5p是否直接介导这些基因的调控，这将为精准医疗时代MS的个体化治疗开辟新途径。