MALAT1/CREG1通过自噬介导的羊膜成纤维细胞分化调控胎膜早破的分子机制及临床意义

为解决胎膜早破(PROM)缺乏有效修复靶点的临床难题，重庆医科大学附属第一医院团队通过单细胞测序和分子对接技术，揭示了长链非编码RNA MALAT1通过结合CREG1蛋白激活自噬通路，促进羊膜成纤维细胞向肌成纤维细胞分化，为PROM治疗提供新靶点。研究发表于《Non-coding RNA Research》，首次阐明自噬在羊膜修复中的关键作用。

　　

胎膜早破(PROM)是导致早产的主要原因之一，每年威胁着全球数百万孕妇的健康。当前临床治疗仅能控制感染和延长妊娠，对破损胎膜缺乏根本性修复手段。更令人担忧的是，胎膜结构中的羊膜层承担着90%的机械负荷，其成纤维细胞的修复能力直接决定胎膜完整性，但相关分子机制始终是未解之谜。

重庆医科大学附属第一医院团队通过创新性研究发现，PROM患者的羊膜组织中存在明显的结构损伤：HE染色显示上皮细胞连接松散，天狼星红染色证实胶原结构瓦解，拉曼光谱更检测到胶原和磷脂成分显著减少。这些现象提示羊膜基质修复异常可能是PROM的关键诱因。

为揭示深层机制，研究者采用单细胞测序技术对20例PROM和20例正常孕妇的胎膜组织进行分析，意外发现羊膜成纤维细胞中长链非编码RNA MALAT1表达异常升高。进一步实验显示，MALAT1通过结合细胞E1A激活基因抑制蛋白CREG1，激活自噬通路(LC3B↑/P62↓)，促使成纤维细胞转化为具有修复功能的肌成纤维细胞(α-SMA↑)。透射电镜观察到PROM组自噬溶酶体数量增加3倍，而敲除MALAT1后自噬流被阻断，细胞迁移能力下降40%。

关键技术包括：单细胞RNA测序分析胎膜细胞亚群；RNA Pull Down和RIP验证MALAT1-CREG1互作；分子对接模拟二者结合构象；透射电镜观察自噬小体；mCherry-GFP-LC3腺病毒示踪自噬流。

【结构异常特征】通过组织学检测首次系统描绘PROM羊膜病理特征：上皮层出现微裂隙(5-10μm)，胶原纤维排列紊乱(I型胶原减少60%)，拉曼光谱显示2850cm^-1
处单不饱和脂肪酸信号减弱。

【单细胞解析】测序数据揭示PROM组肌成纤维细胞比例增加2.3倍，基因富集分析显示自噬相关通路激活。

【分子机制】RNA Pull Down筛选出40个MALAT1结合蛋白，其中CREG1结合能达-8.5kcal/mol。分子对接显示MALAT1三螺旋结构与CREG1二聚体形成12个氢键。

【功能验证】血清饥饿诱导自噬使细胞迁移率提升3倍，而氯喹抑制自噬后α-SMA表达降低55%。

该研究首次阐明MALAT1/CREG1-自噬轴在羊膜修复中的核心作用，为PROM提供了潜在治疗靶点。临床转化方面，监测孕妇羊水中MALAT1水平或可预测PROM风险，而靶向递送MALAT1的外泌体可能成为新型治疗策略。值得注意的是，研究发现的成纤维细胞-自噬-组织修复机制，也为其他膜性器官损伤修复研究提供了新思路。