颌骨牙骨质-骨发育不良中TGFBR2与KRAS基因变异的分子特征及其临床意义

本研究针对颌骨牙骨质-骨发育不良（COD）的分子机制空白，通过靶向测序技术（1036基因panel）分析FFPE样本，首次报道TGFBR2热点变异（p.Arg528His/p.Arg553His）与KRAS非经典变异（p.Lys167Arg），揭示RAS-MAPK通路可能参与COD进展，为这一常见但机制不明的骨病变提供了潜在治疗靶点。

　　

颌骨牙骨质-骨发育不良（Cemento-osseous dysplasia, COD）是口腔颌面部最常见的良性纤维-骨性病变（Benign fibro-osseous lesion, BFOL）之一，好发于牙根尖周区域，患者多为非洲裔女性。尽管其临床诊断主要依赖特征性影像学表现，但长期以来，COD的发病机制如同一个未解之谜。与其他BFOL如纤维异常增殖症（与GNAS突变相关）或骨化性纤维瘤（涉及Wnt/NOTCH通路失调）不同，COD缺乏明确的分子标志物。这种认知空白导致临床处理策略单一——无症状者仅需观察，而进展病例缺乏靶向干预手段。

2023年，Haefliger团队首次在28%的COD样本中检测到RAS-MAPK通路基因（BRAF/HRAS/KRAS等）变异，为这一领域投下曙光。受此启发，田纳西大学健康科学中心的研究团队Adepitan A. Owosho等开展了更深入的探索。他们采用高灵敏度靶向测序技术（覆盖1036个基因），对非脱钙福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织进行分子剖析，相关成果发表于《Oral Surgery, Oral Medicine, Oral Pathology and Oral Radiology》。

关键技术方法包括：1）从7例COD患者的FFPE样本中筛选2例合格样本，使用Promega Maxwell系统提取DNA；2）应用"Unmatched Normals and Mutant Allele Status Characterization"肿瘤专属变异检测流程，提升低频变异的灵敏度与特异性；3）重点分析RAS-MAPK通路相关基因变异及其等位基因频率（Allelic Frequency, AF）。

结果部分

1. 分子变异谱：病例1检出TGFBR2两个经典热点错义变异（p.Arg528His和p.Arg553His，AF=3%），以及KRAS非经典变异（剪接变异AF=10%和p.Lys167Arg错义变异AF=1.4%）。病例2未发现显著变异。
2. 通路分析：TGFBR2作为TGF-β信号通路关键受体，其变异可能导致通路失调；KRAS变异则直接激活RAS-MAPK级联反应，与Haefliger报道的RAS通路异常形成呼应。
3. 临床关联性：低频AF提示变异可能存在于病变亚克隆中，或为继发性事件，暗示COD可能存在多基因协同致病模式。

讨论与意义
该研究首次报道TGFBR2在COD中的致病性变异，拓展了对RAS-MAPK通路在骨病变中作用的认识。尽管变异频率较低，但TGFBR2-p.Arg528His/553His作为转化生长因子β受体（TGF-β receptor）的关键功能域突变，可能通过影响骨基质沉积参与COD进展。KRAS-p.Lys167Arg虽非经典热点，但其位于GTP酶活性区域，理论上可干扰RAS蛋白失活。这些发现为COD的分子分型奠定基础，尤其为进展性病例提供了潜在靶向治疗方向（如MEK抑制剂）。

值得注意的是，研究者强调COD可能存在高度异质性——仅部分样本检出变异，且AF普遍低于10%，提示需扩大样本量验证。未来研究可结合单细胞测序技术，精确解析突变细胞群的空间分布特征。这项研究犹如打开一扇分子窗口，让学界得以窥见COD这个"熟悉陌生人"的遗传本质，为实现从经验性观察到精准医疗的跨越迈出关键一步。