莰烯与甲硝唑联合疗法高效抗蓝氏贾第鞭毛虫感染：机制探索与临床潜力

本研究针对传统抗贾第虫药物副作用大、耐药性突出的问题，通过体外和体内实验证实莰烯(CP)单用及联合甲硝唑(MNZ)可显著降低蓝氏贾第鞭毛虫(G. lamblia)包囊/滋养体存活率(FICI≤0.5)，通过上调ROS、抑制NADHox/PXR1a/SOR抗氧化通路，调节IL-17/IFN-γ水平和caspase-3/-8/-9表达，为开发低毒增效疗法提供新策略。

　　

蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)是全球范围内引发腹泻的主要寄生虫，每年导致2.8亿新发病例。尽管甲硝唑(MNZ)等合成药物疗效显著，但胃肠道副作用、神经毒性及日益严重的耐药性问题制约其临床应用。更棘手的是，贾第虫缺乏传统抗氧化酶却进化出独特防御系统(如NADH氧化酶、过氧化还原蛋白)，使得开发新型抗贾第虫药物面临巨大挑战。在此背景下，天然产物因其低毒、多靶点特性成为研究热点——莰烯(Camphene, CP)作为单萜烯类化合物，在抗菌、抗炎领域已展现潜力，但其抗寄生虫机制尚属空白。

为破解这一难题，来自伊拉克Al-Qadisiyah大学的研究团队在《Parasite Epidemiology and Control》发表重要成果，首次系统评估CP单用及联用MNZ的抗贾第虫效果。研究采用MTT法测定寄生虫活力，流式细胞术检测活性氧(ROS)，qPCR分析基因表达，并通过小鼠感染模型评估体内疗效。结果显示：CP与MNZ联用对滋养体的IC₅₀
低至0.09 μmol/mL，FICI指数0.27-0.39证实协同效应；机制上CP通过剂量依赖性上调ROS(荧光强度达51.3 a.u.)，同时下调NADHox/PXR1a/SOR基因表达(最高降低2.48倍)；动物实验中CP 200 mg/kg+MNZ 5 mg/kg组粪便包囊清除率达100%，并显著改善血清电解质紊乱(Na⁺
159.1 mmol/L)。

关键技术创新
研究建立体外包囊-滋养体双重杀伤模型，采用DCFH-DA荧光探针量化ROS，通过NMRI小鼠感染队列(每组n=8)验证疗效，并首次发现CP能下调caspase-3/-8/-9表达(1.04-1.21倍变化)，28天毒性试验证实CP 200 mg/kg对肝肾功能指标无显著影响。

突破性发现

1. 协同杀伤效应：CP与MNZ联用使抗贾第虫活性提升2.7倍，FICI≤0.5达协同标准，且对滋养体敏感性高于包囊(IC₅₀
   0.45 vs 0.65 μmol/mL)。
2. 氧化应激机制：CP通过"双管齐下"策略——既增加ROS生成(荧光强度40.2 a.u.)，又抑制寄生虫关键抗氧化酶基因(NADHox下调2.11倍)，破坏氧化还原平衡。
3. 免疫调节作用：CP+MNZ组血清IL-17/IFN-γ水平升至301.9 pg/mL和212.3 pg/mL，显著高于MNZ单用组(171.2 pg/mL)，激活Th1/Th17免疫通路。
4. 抗凋亡保护：CP处理使caspase-3/-8/-9表达量降低1.04-1.21倍，有效缓解贾第虫诱导的肠上皮细胞凋亡。

学术价值与展望
该研究首次阐明CP通过"氧化攻击-免疫激活-抗凋亡"三位一体机制对抗贾第虫感染。特别值得注意的是，CP与MNZ联用可使MNZ剂量降低50%仍实现100%包囊清除，这对解决临床耐药性问题具有里程碑意义。但研究也存在局限：CP在肠道的吸收代谢规律尚未明确，且缺乏对寄生虫膜结构破坏的直接电镜证据。未来研究可结合类器官模型和代谢组学，进一步揭示CP的分子靶点，为开发基于天然产物的抗寄生虫鸡尾酒疗法提供新范式。